Identificação e caracterização de polipeptídeos segregados a partir das vesículas colunares da anêmona Bunodosoma cangicum: novos insights sobre a fisiologia dos cnidários venenosos
| Ano de defesa: | 2019 |
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Bastos Junior, Claudio Luis QuaresmaBoyle, Robert Tew2025-02-10T23:09:35Z2025-02-10T23:09:35Z2019BASTOS JUNIOR, Claudio Luis Quaresma. Identificação e caracterização de polipeptídeos segregados a partir das vesículas colunares da anêmona Bunodosoma cangicum: novos insights sobre a fisiologia dos cnidários venenosos. 2019. 103 f. Tese(doutorado) - Programa de Pós-Graduação em Ciências Fisiológicas, Instituto de Ciências Biológicas, Universidade Federal do Rio Grande, Rio Grande, 2019.https://repositorio.furg.br/handle/123456789/12151Tese ( Doutorado)Os cnidários como um todo produzem potentes toxinas com diferentes ações nos mais diversos organismos e níveis organizacionais. Nesta tese iniciamos a caracterização química destes compostos através de técnicas de cromatografia líquida e espectrometria de massas, bem como, a investigação dos efeitos causados por estes compostos em nematódeos, camarões e caranguejos. De modo geral, os efeitos investigados aqui, foram: Morte celular em nematódeos por técnicas de microscopia de fluorescência e análises de respostas reflexas em camarões e caranguejos através de ensaios que analisam as respostas reflexoras dos animais. O objetivo geral deste estudo foi avaliar o efeito das toxinas oriundas das vesículas de Bunodosoma cangicum em nematódeos Caenorhabditis elegans, caranguejos Neohelice granulata e camarões Palaemon argentinus. Além disso, nós vamos propor metodologias alternativas para avaliar respostas fisiológicas em organismos expostos à toxina. Foi validada uma adaptação técnica da análise do tipo de morte celular através da captação seletiva dos corantes brometo de etídio/laranja de acridina em tecidos, permitindo assim avaliar a indução de apoptose ou necrose in vivo. Através desta técnica, observamos a indução de apoptose em nematódeos vivos expostos à toxina. Além disso, foi adaptado um protocolo para avaliar ações reflexas de caranguejos. Esta metodologia será abordada com detalhes no capítulo 2 permitindo quantificar as alterações reflexas decorrentes da exposição de diferentes compostos. Nestas análises, nós observamos que os animais expostos à toxina tinham uma redução em suas ações reflexas. Por fim, foi desenvolvida uma metodologia alternativa ao sistema de eletroforese convencional. Sendo este, objeto de solicitação de proteção de propriedade intelectual ao Instituto Nacional da Propriedade Industrial (INPI). Os dados que serão mostrados ao longo desta tese destacam a presença de novos compostos com efeito no sistema nervoso de crustáceos e capacidade de induzir 7 apoptose em nematódeos vivos. Estes efeitos mostram a importância de avançar os estudos de caracterização dos mesmos, bem como, avaliar os seus efeitos isolados.Cnidaria as a whole produce potent toxins with different actions at the most diverse organisms and organizational levels. In this thesis we begin the chemical characterization of compounds through liquid chromatography (HPLC) and mass spectrometry techniques (MALDI-Tof), as well as the investigation of the effects caused by these compounds on nematodes, shrimps and crabs. In general, the effects investigated here were: Cell death in nematodes by fluorescence microscopy techniques and analysis of reflex responses in shrimps and crabs through assays that analyze the reflex responses of animals. The aim of this study was to evaluate the effect of toxins from Bunodosoma cangicum vesicles on Caenorhabditis elegans nematodes, Neohelice granulata crabs and Palaemon argentinus shrimps. In addition, we will propose alternative methodologies for assessing physiological responses in toxin-exposed organisms. A technical adaptation of the cell death type analysis was validated by selective uptake of the ethidium bromide / acridine orange dyes in tissues, thus allowing the evaluation of apoptosis or necrosis induction in vivo. Through this technique, we observed the induction of apoptosis in living nematodes exposed to the toxin. In addition, a protocol was adapted to evaluate reflex actions of crabs. This methodology will be dealt with in detail in chapter 2 allowing to quantify the reflex changes resulting from exposure of different compounds. In these analyzes, we observed that animals exposed to the toxin had a reduction in their reflex actions. Finally, an alternative methodology to the conventional electrophoresis system was developed. This being the subject of a request for intellectual property protection to the National Institute of Industrial Property (INPI). The data that will be shown throughout this thesis highlight the presence of new compounds with effect on the crustacean nervous system and ability to induce apoptosis in living nematodes. These effects show the importance of 9 advancing their characterization studies, as well as evaluating their isolated effects.porBunodosoma cangicumToxinasVesículasNeuroinibidorEspectrometriaCromatografia Liquida acoplada a espectrometria de massas (LC/MS)Bunodosoma cangicumToxinsVesiclesNeuroinhibitorSpectrometryLiquid Chromatography coupled with mass spectrometry (LC / MS)Identificação e caracterização de polipeptídeos segregados a partir das vesículas colunares da anêmona Bunodosoma cangicum: novos insights sobre a fisiologia dos cnidários venenososinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FURG (RI FURG)instname:Universidade Federal do Rio Grande (FURG)instacron:FURGORIGINALClaudio Luis Quaresma Bastos Junior.pdfClaudio Luis Quaresma Bastos Junior.pdfapplication/pdf5260223https://repositorio.furg.br/bitstreams/48b822b1-626c-4d8a-b7a0-7f3dc5dd7bc2/download9952be9e38acf6e50ee8bfbcaf994cdfMD51trueAnonymousREADLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81748https://repositorio.furg.br/bitstreams/abd2e27e-b809-49cb-9cbf-de859a487e52/download8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD52falseAnonymousREADTEXTClaudio Luis Quaresma Bastos Junior.pdf.txtClaudio Luis Quaresma Bastos Junior.pdf.txtExtracted texttext/plain101420https://repositorio.furg.br/bitstreams/8d4cb913-960e-414b-9d2f-e7d0cc780aaf/download9a5d09dd0fa3ffd7d147531e7b42e304MD53falseAnonymousREADTHUMBNAILClaudio Luis Quaresma Bastos Junior.pdf.jpgClaudio Luis Quaresma Bastos Junior.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg3309https://repositorio.furg.br/bitstreams/00dde053-737d-4533-8d2b-cff5ba2e8ef1/downloada548588baa4cb7614bfa06c6ee96481cMD54falseAnonymousREAD123456789/121512025-12-10 00:54:21.382open.accessoai:repositorio.furg.br:123456789/12151https://repositorio.furg.brRepositório InstitucionalPUBhttps://repositorio.furg.br/oai/request || http://200.19.254.174/oai/requestrepositorio@furg.br||sib.bdtd@furg.bropendoar:2025-12-10T03:54:21Repositório Institucional da FURG (RI FURG) - Universidade Federal do Rio Grande (FURG)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 |
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