PROTEÍNAS DO PLASMA SEMINAL NA CRIOPRESERVAÇÃO DO SÊMEN OVINO EM ÁGUA DE COCO EM PÓ (ACP-102c) OU TRIS

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2012
Autor(a) principal: CAVALCANTE, JOSÉ MAURÍCIO MACIEL
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=91341
Resumo: O plasma seminal ou suas proteínas favorecem a motilidade e fertilidade do sêmen ovino <br/>criopreservado, tornando importante o estudo da interação destas proteínas com os diluentes <br/>seminais. Este trabalho teve como objetivo avaliar a relação da concentração proteica e perfil <br/>eletroforético do plasma seminal de ejaculados ovinos com sua congelabilidade e estudar o <br/>efeito da adição do plasma seminal ou de suas proteínas liofilizadas aos diluidores ACP-102c <br/>ou TRIS antes da criopreservação ou ao sêmen descongelado criopreservado nestes <br/>diluidores. Para a avaliação da concentração proteica e perfil eletroforético do plasma seminal <br/>de ejaculados com sua congelabilidade, sêmen de ovinos Santa Inês (n=2) e Dorper (n=2) <br/>foram colhidos para obtenção do plasma seminal e criopreservação em ACP-102c ou TRIS. A <br/>concentração de proteína do plasma seminal foi determinado pelo método de Bradford e seu <br/>perfil proteico foi determinado por eletroforese bidimensional em gel de poliacrilamida. O <br/>sêmen (fresco ou criopreservado) foi avaliado para parâmetros de motilidade em sistema <br/>computadorizado de análise de sêmen (CASA), viabilidade espermática (pelo teste de <br/>coloração eosina-nigrosina), integridade do acrossoma (por coloração com Marrom de <br/>Bismark e Rosa Bengala) e teste hiposmótico (HOST). Quanto aos efeitos da adição do <br/>plasma seminal ao sêmen descongelado, sêmen de carneiros Santa Inês e Dorper <br/>criopreservados em ACP-102c ou TRIS foram descongelados e diluídos (1:1) no respectivo <br/>diluidor (controle) ou com diluidor suplementado com plasma seminal (concentração final de <br/>30%). Quanto aos efeitos na congelação do sêmen pela adição de plasma seminal ovino ou de <br/>sua fração proteica liofilizada aos diluidores experimentais, sêmen de carneiros Santa Inês e <br/>Dorper foram criopreservados em ACP-102c e TRIS (controle), criopreservados nestes <br/>diluidores adicionados a 30% de plasma seminal ovino (ACP+PS e TRIS+PS) ou adicionados <br/>a proteínas liofilizadas do plasma seminal (ACP+PT e TRIS+PT). Em ambos os <br/>experimentos, o sêmen foi avaliado quanto a motilidade seminal (CASA), HOST e <br/>viabilidade espermática pelo teste de coloração eosina-nigrosina bem como pela avaliação <br/>simultânea da integridade da membrana plasmática e acrossoma e da função mitocondrial <br/>com sondas fluorescentes IP/FITC-PSA/JC-1. Correlações positivas foram encontradas entre <br/>a concentração de proteína com os parâmetros motilidade progressiva e congelabilidade e <br/>negativa para deslocamento lateral de cabeça nas amostras criopreservadas em ambos <br/>diluidores. Além disso, a intensidade de oito spots e três sequências de isoformas tiveram <br/>variação significativa com a congelabilidade dos ejaculados obtidos. Não foram observados <br/>efeitos da adição do plasma seminal ao sêmen descongelado criopreservado em ACP-102c. <br/>No entanto, a adição do plasma seminal ovino após descongelação do sêmen criopreservado <br/><br/><br/>&nbsp;<br/>Em TRIS aumentou a motilidade progressiva e viabilidade.Tanto ACP+PS e TRIS+PS <br/>resultaram em aumento na motilidade total e progressiva e no HOST. Entretanto, a <br/>suplementação dos diluidores ACP-102c e TRIS com proteínas liofilizadas não promoveram <br/>melhoria na qualidade do sêmen. Conclui-se que a concentração e o perfil eletroforético de <br/>proteínas do plasma seminal de ejaculados ovinos estão relacionados com a congelabilidade <br/>do sêmen e que a adição de plasma seminal aos diluidores ACP-102c e TRIS, mas não de suas <br/>proteínas liofilizadas, melhorou a qualidade do sêmen ovino criopreservado. <br/><br/>&nbsp;<br/><br/>Palavras-chave: Plasma seminal. Proteínas liofilizadas. ACP-102c. Sêmen. Congelação. <br/>
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A <br/>concentração de proteína do plasma seminal foi determinado pelo método de Bradford e seu <br/>perfil proteico foi determinado por eletroforese bidimensional em gel de poliacrilamida. O <br/>sêmen (fresco ou criopreservado) foi avaliado para parâmetros de motilidade em sistema <br/>computadorizado de análise de sêmen (CASA), viabilidade espermática (pelo teste de <br/>coloração eosina-nigrosina), integridade do acrossoma (por coloração com Marrom de <br/>Bismark e Rosa Bengala) e teste hiposmótico (HOST). Quanto aos efeitos da adição do <br/>plasma seminal ao sêmen descongelado, sêmen de carneiros Santa Inês e Dorper <br/>criopreservados em ACP-102c ou TRIS foram descongelados e diluídos (1:1) no respectivo <br/>diluidor (controle) ou com diluidor suplementado com plasma seminal (concentração final de <br/>30%). Quanto aos efeitos na congelação do sêmen pela adição de plasma seminal ovino ou de <br/>sua fração proteica liofilizada aos diluidores experimentais, sêmen de carneiros Santa Inês e <br/>Dorper foram criopreservados em ACP-102c e TRIS (controle), criopreservados nestes <br/>diluidores adicionados a 30% de plasma seminal ovino (ACP+PS e TRIS+PS) ou adicionados <br/>a proteínas liofilizadas do plasma seminal (ACP+PT e TRIS+PT). Em ambos os <br/>experimentos, o sêmen foi avaliado quanto a motilidade seminal (CASA), HOST e <br/>viabilidade espermática pelo teste de coloração eosina-nigrosina bem como pela avaliação <br/>simultânea da integridade da membrana plasmática e acrossoma e da função mitocondrial <br/>com sondas fluorescentes IP/FITC-PSA/JC-1. Correlações positivas foram encontradas entre <br/>a concentração de proteína com os parâmetros motilidade progressiva e congelabilidade e <br/>negativa para deslocamento lateral de cabeça nas amostras criopreservadas em ambos <br/>diluidores. Além disso, a intensidade de oito spots e três sequências de isoformas tiveram <br/>variação significativa com a congelabilidade dos ejaculados obtidos. Não foram observados <br/>efeitos da adição do plasma seminal ao sêmen descongelado criopreservado em ACP-102c. <br/>No entanto, a adição do plasma seminal ovino após descongelação do sêmen criopreservado <br/><br/><br/>&nbsp;<br/>Em TRIS aumentou a motilidade progressiva e viabilidade.Tanto ACP+PS e TRIS+PS <br/>resultaram em aumento na motilidade total e progressiva e no HOST. Entretanto, a <br/>suplementação dos diluidores ACP-102c e TRIS com proteínas liofilizadas não promoveram <br/>melhoria na qualidade do sêmen. Conclui-se que a concentração e o perfil eletroforético de <br/>proteínas do plasma seminal de ejaculados ovinos estão relacionados com a congelabilidade <br/>do sêmen e que a adição de plasma seminal aos diluidores ACP-102c e TRIS, mas não de suas <br/>proteínas liofilizadas, melhorou a qualidade do sêmen ovino criopreservado. <br/><br/>&nbsp;<br/><br/>Palavras-chave: Plasma seminal. Proteínas liofilizadas. ACP-102c. Sêmen. Congelação. <br/>The seminal plasma or its proteins favoring the motility and fertility of the cryopreserved ram <br/>semen, making it important to study the interaction of these proteins with semen extenders. <br/>This work aimed to evaluate the relation protein concentration and electrophoretic profile of <br/>ram seminal plasma with their ejaculates freezability and to study the effect of addition of <br/>seminal plasma or its lyophilized proteins to ACP-102c or TRIS extenders before <br/>cryopreservation or add to frozen thawed semen cryopreserved in these extenders. To evaluate <br/>the relation between protein concentration and electrophoretic profile of seminal plasma of <br/>ejaculates with its freezability, semen of Santa Ines (n = 2) and Dorper (n = 2) rams were <br/>collected to obtain seminal plasma and for semen cryopreservation using both ACP-102c as in <br/>TRIS extenders. The Bradford method was used for protein content determination while the <br/>seminal plasma protein profile of ejaculated was determined by two-dimensional <br/>electrophoresis in polyacrylamide gel. The semen (fresh or cryopreserved) was evaluated for <br/>motility by computer-assisted semen analysis (CASA), sperm viability (by eosin-nigrosin <br/>test) acrosomal integrity (using Bismark brown and Bengal Rose staining technique) and by <br/>hypoosmotic swelling test (HOST). To evaluated the effects of addition of seminal plasma to <br/>frozen-thawed ram semen cryopreserved in ACP-102c and TRIS, semen from Santa Ines and <br/>Dorper rams cryopreserved in these extenders were thawed and diluted (1:1) in its respective <br/>extender (control) or to extender supplemented with ram seminal plasma (30% final <br/>concentration). Regarding the effects of semen cryopreservation by addition of ram seminal <br/>plasma or its lyophilized protein fraction in the experimental extenders, semen of Santa Ines <br/>and Dorper rams were cryopreserved in ACP-102c and TRIS (control), added with 30% of <br/>ram seminal plasma (ACP+PS and TRIS+PS), or added with lyophilized seminal plasma <br/>protein (ACP+PT and TRIS+PT). In both experiments, the semen was evaluated for motility <br/>parameters (CASA), HOST and sperm viability by eosin-nigrosin staining test and <br/>simultaneous assessment of plasma and acrosomal membrane integrity and mitochondrial <br/>function by association of fluorescent probes PI/FITC-PSA/JC-1. Positive correlations were <br/>found between the protein concentration with progressive motility and freezability parameters <br/>and negative for lateral displacement of the head for samples cryopreserved in both extenders. <br/>Furthermore, the intensity of eight spots and three isoforms sequences had significant <br/>variation in freezability of the obtained ejaculates. No effects were observed on the <br/>parameters evaluated by the addition of seminal plasma to thawed semen cryopreserved in <br/>ACP-102c. However, the addition of ram seminal plasma after thawing in the semen <br/><br/><br/>&nbsp;<br/>Cryopreserved in TRIS increased the motility and viability parameters. Both ACP+PS and <br/>TRIS+PS treatments resulted in increased of total and progressive motility and HOST. <br/>However, supplementation of the ACP-102c and TRIS extenders with lyophilized proteins did <br/>not promote improvement in semen quality. In conclusion, both the seminal plasma proteins <br/>content and protein profile of ram ejaculates were related to semen freezability and that the <br/>addition of seminal plasma extenders to ACP-102c and TRIS, but not its protein lyophilized <br/>improved sperm quality of cryopreserved ram semen. &nbsp;<br/><br/>&nbsp;<br/><br/>Keywords: Seminal plasma. Lyophilized protein. ACP-102c. Semen. CryopreservationUniversidade Estadual do CearáJOSE FERREIRA NUNESCAVALCANTE, JOSÉ MAURÍCIO MACIEL2019-09-16T15:20:12Z2012info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=91341info:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da UECEinstname:Universidade Estadual do Cearáinstacron:UECE2019-09-16T15:20:12Zoai:uece.br:91341Repositório InstitucionalPUBhttps://siduece.uece.br/siduece/api/oai/requestopendoar:2019-09-16T15:20:12Repositório Institucional da UECE - Universidade Estadual do Cearáfalse
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