Efeito de meios de re-diluição pós-descongelação sobre a cinética e morfologia de espermatozóides caprinos congelados em meio à base de água de coco em pó (ACP-101) ou TRIS

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2007
Autor(a) principal: Oliveira, Rodrigo Vasconcelos de
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=46206
Resumo: <div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">O trabalho teve como objetivos: avaliar “in vitro” o sêmen caprino congelado nos&nbsp;</span></font><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">meios diluentes à base de água de coco em pó (ACP-101) e TRIS (hidroxi-metil&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">amino metano); analisar o efeito de soluções para re-diluição seminal pósdescongelação&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">por meio de parâmetros cinéticos mensurados pelo sistema Sperm&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">Class Analyser® e; comparar a eficiência do corante azul de bromofenol (AB) com o&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">corante clássico de eosina- igrosina (EN) na avaliação morfológica do sêmen&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">caprino fresco e descongelado submetidos ao teste de termo-resistência. Foram&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">utilizados quatro bodes. Os diluentes empregados foram: ACP-101 (+ 2,5% gema&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">ovo + 7% glicerol) e TRIS (+ 20% gema ovo + 6,8% glicerol). Os ejaculados foram&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">coletados por vagina artificial, avaliados quanto a: volume, concentração, motilidade&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">massal, porcentagem de espermatozóides móveis, motilidade individual progressiva,&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">porcentagem de vivos e mortos e, alterações morfológicas. Em seguida, divididos&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">em duas alíquotas, diluídas nos tratamentos experimentais ACP-101 e TRIS. As&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">amostras foram refrigeradas até 4ºC, envasadas em palhetas, congeladas em&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">vapores de nitrogênio, armazenadas em botijão criogênico (-196ºC) e&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">descongeladas após 30 dias. As avaliações de motilidade espermática auxiliada por&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">computador foram realizadas aos 5, 60 e 120 minutos pós-descongelação. Para rediluição&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">pós-descongelação foram utilizados diluente base (DB: ACP-101 ou TRIS&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">sem gema e sem glicerol), soluções de Ringer Lactato (RL) e de NaCl a 0,9% (SF).&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">Três palhetas de cada tratamento por ejaculado avaliadas e re-diluídas, com uma&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">das três soluções de re-diluição. Os parâmetros de motilidade espermática auxiliada&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">por computador analisados foram: motilidades total (MT) (%) e progressiva (MP) (%),&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">velocidades média do trajeto do espermatozóide (VAP) (&#956;m/s) e linear (VSL) (&#956;m/s),&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">e população de espermatozóides rápidos (ER) (%). A morfologia espermática foi&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">avaliada, aos 5 e 120 minutos pós-descongelação, por meio de esfregaços corados&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">por EN e AB. Os parâmetros morfológicos avaliados foram: espermatozóides&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">normais (N), alterações de cabeça (AC), de peça intermediária (API), e de flagelo&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">(AF), gotas citoplasmáticas proximal (GCP), e distal (GCD), e cabeça destacada&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">(CD). Os dados foram submetidos à ANOVA e aos teste de Duncan e Tukey (P &lt;&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">0,05). Independentemente da variável cinética, o tratamento ACP x RL apresentouse&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">significativamente inferior durante o teste de termo-resistência. O diluente à base&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">de TRIS apresentou resultados cinéticos significativamente superiores ao ACP-101,&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">aos 60 e 120 minutos. Os espermatozóides diluídos e congelados no TRIS não&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">sofreram influência das soluções de re-diluição pós-descongelação. Não existiu&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">diferença significativa na observação de N entre tratamentos após 5 minutos do&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">teste de termo-resistência. Após 120 minutos a quantificação de N foi influenciada&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">significativamente pelo diluente, tendo o TRIS apresentado resultados superiores. O&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">período de incubação de 120 minutos a 37oC promoveu o aumento das AC. Os&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">parâmetros cinéticos, após 5 minutos de incubação a 37oC, dos espermatozóides&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">diluídos e congelados em meio à base de ACP-101 demonstram sua potencialidade&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">na criopreservação seminal de bodes. O meio diluente à base de TRIS promoveu&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">uma maior proteção quanto às crioinjúrias em espermatozóides caprinos&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">congelados. O corante azul de bromofenol demonstrou ser eficiente na avaliação do&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">sêmen caprino fresco e pós-descongelação.&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">Palavras-chave: caprinos; espermatozóides; água de coco em pó; TRIS; eosinanigrosina;&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">azul de bromofenol.</span></div>
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spelling Efeito de meios de re-diluição pós-descongelação sobre a cinética e morfologia de espermatozóides caprinos congelados em meio à base de água de coco em pó (ACP-101) ou TRISÁgua de coco em pó Caprinos Ciências veterinárias Espermatozoide<div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">O trabalho teve como objetivos: avaliar “in vitro” o sêmen caprino congelado nos&nbsp;</span></font><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">meios diluentes à base de água de coco em pó (ACP-101) e TRIS (hidroxi-metil&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">amino metano); analisar o efeito de soluções para re-diluição seminal pósdescongelação&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">por meio de parâmetros cinéticos mensurados pelo sistema Sperm&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">Class Analyser® e; comparar a eficiência do corante azul de bromofenol (AB) com o&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">corante clássico de eosina- igrosina (EN) na avaliação morfológica do sêmen&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">caprino fresco e descongelado submetidos ao teste de termo-resistência. Foram&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">utilizados quatro bodes. Os diluentes empregados foram: ACP-101 (+ 2,5% gema&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">ovo + 7% glicerol) e TRIS (+ 20% gema ovo + 6,8% glicerol). Os ejaculados foram&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">coletados por vagina artificial, avaliados quanto a: volume, concentração, motilidade&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">massal, porcentagem de espermatozóides móveis, motilidade individual progressiva,&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">porcentagem de vivos e mortos e, alterações morfológicas. Em seguida, divididos&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">em duas alíquotas, diluídas nos tratamentos experimentais ACP-101 e TRIS. As&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">amostras foram refrigeradas até 4ºC, envasadas em palhetas, congeladas em&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">vapores de nitrogênio, armazenadas em botijão criogênico (-196ºC) e&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">descongeladas após 30 dias. As avaliações de motilidade espermática auxiliada por&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">computador foram realizadas aos 5, 60 e 120 minutos pós-descongelação. Para rediluição&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">pós-descongelação foram utilizados diluente base (DB: ACP-101 ou TRIS&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">sem gema e sem glicerol), soluções de Ringer Lactato (RL) e de NaCl a 0,9% (SF).&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">Três palhetas de cada tratamento por ejaculado avaliadas e re-diluídas, com uma&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">das três soluções de re-diluição. Os parâmetros de motilidade espermática auxiliada&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">por computador analisados foram: motilidades total (MT) (%) e progressiva (MP) (%),&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">velocidades média do trajeto do espermatozóide (VAP) (&#956;m/s) e linear (VSL) (&#956;m/s),&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">e população de espermatozóides rápidos (ER) (%). A morfologia espermática foi&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">avaliada, aos 5 e 120 minutos pós-descongelação, por meio de esfregaços corados&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">por EN e AB. Os parâmetros morfológicos avaliados foram: espermatozóides&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">normais (N), alterações de cabeça (AC), de peça intermediária (API), e de flagelo&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">(AF), gotas citoplasmáticas proximal (GCP), e distal (GCD), e cabeça destacada&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">(CD). Os dados foram submetidos à ANOVA e aos teste de Duncan e Tukey (P &lt;&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">0,05). Independentemente da variável cinética, o tratamento ACP x RL apresentouse&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">significativamente inferior durante o teste de termo-resistência. O diluente à base&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">de TRIS apresentou resultados cinéticos significativamente superiores ao ACP-101,&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">aos 60 e 120 minutos. Os espermatozóides diluídos e congelados no TRIS não&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">sofreram influência das soluções de re-diluição pós-descongelação. Não existiu&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">diferença significativa na observação de N entre tratamentos após 5 minutos do&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">teste de termo-resistência. Após 120 minutos a quantificação de N foi influenciada&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">significativamente pelo diluente, tendo o TRIS apresentado resultados superiores. O&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">período de incubação de 120 minutos a 37oC promoveu o aumento das AC. Os&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">parâmetros cinéticos, após 5 minutos de incubação a 37oC, dos espermatozóides&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">diluídos e congelados em meio à base de ACP-101 demonstram sua potencialidade&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">na criopreservação seminal de bodes. O meio diluente à base de TRIS promoveu&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">uma maior proteção quanto às crioinjúrias em espermatozóides caprinos&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">congelados. O corante azul de bromofenol demonstrou ser eficiente na avaliação do&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">sêmen caprino fresco e pós-descongelação.&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">Palavras-chave: caprinos; espermatozóides; água de coco em pó; TRIS; eosinanigrosina;&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">azul de bromofenol.</span></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">The aim of the work was: to evaluate “in vitro” the goat semen frozen in diluents&nbsp;</span></font><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">media based on powder coconut water (PCW-101) and TRIS (hydroxymethyl amino&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">methane); analyze the effect of solution for redilution of semen samples post-thawing&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">through kinetic parameters measured by Sperm Class Analyser ® and; compare the&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">bromophenol blue stain efficiency with the classic stain eosin-nigrosin on the&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">morphologic evaluation of fresh and post-thawing goat semen submitted to thermo&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">resistance test. Four goats were utilized. The employed diluents were: PCW-101 (+&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">2,5% egg yolk + 7% glycerol) and TRIS (+ 20% egg yolk + 6,8% glycerol). The&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">ejaculateds were collected using artificial vagina, assessed for: volume,&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">concentration, mass motility, percentage of motile spermatozoa, and progressive&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">individual motility. Right away, each ejaculate was divided into two aliquots and&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">diluted into the experimental treatments PCW-101 and TRIS. The samples were&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">refrigerated to 4ºC, glycerolated, loaded into straws, frozen into nitrogen vapors (-&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">100ºC), stored into cryogenic tank (-196ºC) and thawed after 30 days. The spermatic&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">motility evaluations assisted by computer were placed into 5, 60 and 120 minutes&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">post-thawing. For redilution post-thawing were utilized basis diluent (BD: PCW-101 or&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">TRIS without yolk and without glycerol), Ringer Lactate solutions (RL) and 0,9% NaCl&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">(PS). Three straws from each treatment were thawed, being each an evaluated and&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">rediluied, with one of the three solutions for redilutions, respectively. The motion&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">parameters assisted by computer assessed were: total motility (TM) (%), progressive&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">motility (PM) (%), average path velocity (VAP) (&#956;m/s), straight linear velocity (VSL)&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">(&#956;m/s), and population of rapid spermatozoa (RS) (%). Spermatic morphology was&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">evaluated at 5 and 120 minutes post-thaw, through semen smears stained by eosinnigrosin&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">(EN) and bromophenol blue (BB). The morphologic parameters evaluated&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">were: normal spermatozoa (N), head alteration (HA), intermediary piece alteration&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">(IPA), tail alteration (TA), proximal citoplasmic drop (PCD), distal citoplasmic drop&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">(DCD), and detached head (DH). The data were analyzed using ANOVA and&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">Duncan’s and Tukey tests with 5% of probability (SAS Institute Inc, Cary, NC, USA).&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">Independently of the kinetic variable studied, the treatment PCW x RL showed&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">significantly inferior to the other during the thermo resistance test. The media based&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">on TRIS showed kinetic results significantly superior to PCW-101, to the 60 and 120&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">min. The spermatozoa diluted and frozen on TRIS didn’t suffer the redilution solution&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">influence post-thaw. There wasn’t significant difference in the observation of N&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">between media staining and their interactions after 5 minutes of thermo resistance&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">test. After 120, the N was significantly influenced by media, where the TRIS&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">presented better results. The incubation period of 120 minutes at 37ºC affect the&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">spermatic morphology, increasing the HA percentages into all treatments. Kinetic&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">parameters, after five minutes incubated at 37ºC, of goat spermatozoa diluted and&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">frozen on media based on PCW-101 showed the potentiality of this media on buck&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">seminal cryopreservation. The media based on TRIS promoted better protection from&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">the cryoinjuries on frozen goat spermatozoa. Bromophenol blue staining was efficient&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">on the fresh and post-thaw goat semen evaluation.&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">Keywords: goat; spermatozoa; powder coconut water; TRIS; eosin-nigrosin;</span></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">bromophenol blue.</span></font></div>Universidade Estadual do CearáCristiane Clemente de Mello SalgueiroOliveira, Rodrigo Vasconcelos de2007-11-30T00:00:00Z2007info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=46206info:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da UECEinstname:Universidade Estadual do Cearáinstacron:UECE2007-11-30T00:00:00Zoai:uece.br:46206Repositório InstitucionalPUBhttps://siduece.uece.br/siduece/api/oai/requestopendoar:2007-11-30T00:00Repositório Institucional da UECE - Universidade Estadual do Cearáfalse
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title_fullStr Efeito de meios de re-diluição pós-descongelação sobre a cinética e morfologia de espermatozóides caprinos congelados em meio à base de água de coco em pó (ACP-101) ou TRIS
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title_sort Efeito de meios de re-diluição pós-descongelação sobre a cinética e morfologia de espermatozóides caprinos congelados em meio à base de água de coco em pó (ACP-101) ou TRIS
author Oliveira, Rodrigo Vasconcelos de
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Caprinos
Ciências veterinárias
Espermatozoide
topic Água de coco em pó
Caprinos
Ciências veterinárias
Espermatozoide
description <div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">O trabalho teve como objetivos: avaliar “in vitro” o sêmen caprino congelado nos&nbsp;</span></font><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">meios diluentes à base de água de coco em pó (ACP-101) e TRIS (hidroxi-metil&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">amino metano); analisar o efeito de soluções para re-diluição seminal pósdescongelação&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">por meio de parâmetros cinéticos mensurados pelo sistema Sperm&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">Class Analyser® e; comparar a eficiência do corante azul de bromofenol (AB) com o&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">corante clássico de eosina- igrosina (EN) na avaliação morfológica do sêmen&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">caprino fresco e descongelado submetidos ao teste de termo-resistência. Foram&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">utilizados quatro bodes. Os diluentes empregados foram: ACP-101 (+ 2,5% gema&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">ovo + 7% glicerol) e TRIS (+ 20% gema ovo + 6,8% glicerol). Os ejaculados foram&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">coletados por vagina artificial, avaliados quanto a: volume, concentração, motilidade&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">massal, porcentagem de espermatozóides móveis, motilidade individual progressiva,&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">porcentagem de vivos e mortos e, alterações morfológicas. Em seguida, divididos&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">em duas alíquotas, diluídas nos tratamentos experimentais ACP-101 e TRIS. As&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">amostras foram refrigeradas até 4ºC, envasadas em palhetas, congeladas em&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">vapores de nitrogênio, armazenadas em botijão criogênico (-196ºC) e&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">descongeladas após 30 dias. As avaliações de motilidade espermática auxiliada por&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">computador foram realizadas aos 5, 60 e 120 minutos pós-descongelação. Para rediluição&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">pós-descongelação foram utilizados diluente base (DB: ACP-101 ou TRIS&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">sem gema e sem glicerol), soluções de Ringer Lactato (RL) e de NaCl a 0,9% (SF).&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">Três palhetas de cada tratamento por ejaculado avaliadas e re-diluídas, com uma&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">das três soluções de re-diluição. Os parâmetros de motilidade espermática auxiliada&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">por computador analisados foram: motilidades total (MT) (%) e progressiva (MP) (%),&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">velocidades média do trajeto do espermatozóide (VAP) (&#956;m/s) e linear (VSL) (&#956;m/s),&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">e população de espermatozóides rápidos (ER) (%). A morfologia espermática foi&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">avaliada, aos 5 e 120 minutos pós-descongelação, por meio de esfregaços corados&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">por EN e AB. Os parâmetros morfológicos avaliados foram: espermatozóides&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">normais (N), alterações de cabeça (AC), de peça intermediária (API), e de flagelo&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">(AF), gotas citoplasmáticas proximal (GCP), e distal (GCD), e cabeça destacada&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">(CD). Os dados foram submetidos à ANOVA e aos teste de Duncan e Tukey (P &lt;&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">0,05). Independentemente da variável cinética, o tratamento ACP x RL apresentouse&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">significativamente inferior durante o teste de termo-resistência. O diluente à base&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">de TRIS apresentou resultados cinéticos significativamente superiores ao ACP-101,&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">aos 60 e 120 minutos. Os espermatozóides diluídos e congelados no TRIS não&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">sofreram influência das soluções de re-diluição pós-descongelação. Não existiu&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">diferença significativa na observação de N entre tratamentos após 5 minutos do&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">teste de termo-resistência. Após 120 minutos a quantificação de N foi influenciada&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">significativamente pelo diluente, tendo o TRIS apresentado resultados superiores. O&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">período de incubação de 120 minutos a 37oC promoveu o aumento das AC. Os&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">parâmetros cinéticos, após 5 minutos de incubação a 37oC, dos espermatozóides&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">diluídos e congelados em meio à base de ACP-101 demonstram sua potencialidade&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">na criopreservação seminal de bodes. O meio diluente à base de TRIS promoveu&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">uma maior proteção quanto às crioinjúrias em espermatozóides caprinos&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">congelados. O corante azul de bromofenol demonstrou ser eficiente na avaliação do&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">sêmen caprino fresco e pós-descongelação.&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">Palavras-chave: caprinos; espermatozóides; água de coco em pó; TRIS; eosinanigrosina;&nbsp;</span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">azul de bromofenol.</span></div>
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