Resposta imune humoral em camundongos à sub-fração obtida por digestão enzimática (tripsina) do antígeno de alta massa molecular de Paracoccidioides brasiliensis

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2024
Autor(a) principal: Gerez, Juliana Rubira
Orientador(a): Itano, Eiko Nakagawa [Orientador]
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Não Informado pela instituição
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Paracoccidioides brasiliensis
Paracoccidioidomicose
Tripsina
Resposta imune
Immune response
Trypsin
Link de acesso: https://repositorio.uel.br/handle/123456789/11060
Resumo: Resumo: Paracoccidioidomicose (PCM) é uma micose sistêmica causada pelo fungo dimórfico Paracoccidioides brasiliensis que libera diversos componentes imunogênicos, dentre eles o de alta massa molecular (hMM) O objetivo desse trabalho foi obter a sub-fração do componente de alta massa molecular por digestão com tripsina, assim como avaliar a resposta imune humoral a este componente na paracoccidioidomicose experimental Inicialmente a fração hMM (~38KDa) foi obtida por cromatografia em Coluna de Sephadex G - 2 e a seguir tratada com tripsina por 6', 12', 15' a 37ºC e re-analisada por Cromatografia em Coluna de Sephadex G 1 A sub - fração F17 -II selecionada foi analisada por SDS - PAGE e utilizada na imunização de camundongos BALB/c A seguir foi analisado o nível de IgG anti-gp43 , anti-hMM e gp43 solúvel nos grupos experimentais de camundongos normal, imunizado, imunizado/infectado e infectado utilizando ELISA indireto e ELISA de captura Os resultados obtidos demonstraram nível significativo de IgG anti - sub-fração F17 -II 28 e 56 dias pós imunização No entanto não houve diferença significativa no nível de IgG anti-sub-fração F17 -II entre o grupo imunizado/infectado e infectado Foi observado nível elevado de IgG anti - gp43 ou anti - hMM nos animais infectados em relação ao controle mas não entre infectados e imunizados/infectados Concluímos pelo trabalho que a fração hMM de P brasiliensis apresenta suscetibilidade à ação da enzima tripsina, podendo gerar dois fragmentos de massa molecular distintas em função do tempo de incubação A F17-II resultante da digestão com tripsina apresenta massa molecular similar a gp43 e não é capaz de potencializar a resposta imune humoral na PCM experimental em camundongos por processo de imunização
id UEL_28bbd6b7230efeebddc4c022e0469ab8
oai_identifier_str oai:repositorio.uel.br:123456789/11060
network_acronym_str UEL
network_name_str Repositório Institucional da UEL
repository_id_str
spelling Gerez, Juliana RubiraNakamura, Celso Vataru3ae24a7b-2248-4bf2-a5f5-444d06818558-1Venâncio, Emerson Josécf4704ad-ec83-44fd-9a87-7f0acde636b1-168d6f6c7-3d78-4e7a-af80-7dc131e061a499be7295-863f-4f3f-97ca-f870b6d1fbbbItano, Eiko Nakagawa [Orientador]Londrina2024-05-01T13:09:45Z2024-05-01T13:09:45Z2007.0006.05.2007https://repositorio.uel.br/handle/123456789/11060Resumo: Paracoccidioidomicose (PCM) é uma micose sistêmica causada pelo fungo dimórfico Paracoccidioides brasiliensis que libera diversos componentes imunogênicos, dentre eles o de alta massa molecular (hMM) O objetivo desse trabalho foi obter a sub-fração do componente de alta massa molecular por digestão com tripsina, assim como avaliar a resposta imune humoral a este componente na paracoccidioidomicose experimental Inicialmente a fração hMM (~38KDa) foi obtida por cromatografia em Coluna de Sephadex G - 2 e a seguir tratada com tripsina por 6', 12', 15' a 37ºC e re-analisada por Cromatografia em Coluna de Sephadex G 1 A sub - fração F17 -II selecionada foi analisada por SDS - PAGE e utilizada na imunização de camundongos BALB/c A seguir foi analisado o nível de IgG anti-gp43 , anti-hMM e gp43 solúvel nos grupos experimentais de camundongos normal, imunizado, imunizado/infectado e infectado utilizando ELISA indireto e ELISA de captura Os resultados obtidos demonstraram nível significativo de IgG anti - sub-fração F17 -II 28 e 56 dias pós imunização No entanto não houve diferença significativa no nível de IgG anti-sub-fração F17 -II entre o grupo imunizado/infectado e infectado Foi observado nível elevado de IgG anti - gp43 ou anti - hMM nos animais infectados em relação ao controle mas não entre infectados e imunizados/infectados Concluímos pelo trabalho que a fração hMM de P brasiliensis apresenta suscetibilidade à ação da enzima tripsina, podendo gerar dois fragmentos de massa molecular distintas em função do tempo de incubação A F17-II resultante da digestão com tripsina apresenta massa molecular similar a gp43 e não é capaz de potencializar a resposta imune humoral na PCM experimental em camundongos por processo de imunizaçãoDissertação (Mestrado em Patologia Experimental) - Universidade Estadual de Londrina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Patologia ExperimentalAbstract: Paracoccidioides brasiliensis (Pb), the etiologic agent of a systemic mycosis, produces high molecular mass (hMM) antigens The objective of this investigation was to obtain the sub - fraction from hMM antigens by trypsin digestion, as well as evaluate the humoral immune response to this component in the murine experimental PCM The hMM fraction (~38KDa) was obtained by Sephadex G-2 cromatography and digested with trypsin at 37ºC during 6, 12, 15 min followed by cromatography on Sephadex G-1 Two fractions were obtained and the selected sub-fraction (F17-II) was analyzed by SDS-PAGE Groups of BALB/c mice were immunized with F17-II and the levels of IgG anti- F17-II were analyzed in serum samples from 28 and 56 days post-immunization by ELISA Additionally, groups of mice immunized/infected (iv) with 1 x 16 yeast cells (Pb18) and as controls only infected or inoculated with adjuvant or with PBS were used After 56 days post-infection the levels of IgG anti-gp43, IgG anti-hMM and soluble gp43 were analyzed by indiret and capture ELISA A significant high level of IgG to F17-II (p<1) was observed in 28 and 56 days post-immunization The analysis of serum IgG anti- gp43, IgG anti-hMM and soluble gp43 demonstrated a higher level in the group of infected animals in relation to the control but not among immunized/infected and infected groups In conclusion, the hMM antigen is susceptible to trypsin and at least two digestion products, one with MM ~ 43 kDa (F17-II) can be obtained Also this sub-fraction F17-II doesn't present the capacity to increase the humoral immune response in murine PCMporParacoccidioides brasiliensisParacoccidioidomicoseTripsinaResposta imuneImmune responseTrypsinResposta imune humoral em camundongos à sub-fração obtida por digestão enzimática (tripsina) do antígeno de alta massa molecular de Paracoccidioides brasiliensisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisMestradoPatologia ExperimentalCentro de Ciências BiológicasPrograma de Pós-Graduação em Patologia Experimental-1-1reponame:Repositório Institucional da UELinstname:Universidade Estadual de Londrina (UEL)instacron:UELinfo:eu-repo/semantics/openAccess123063vtls000124161SIMvtls000124161http://bibliotecadigital.uel.br/document/?code=vtls00012416160.00NÃOhttp://www.bibliotecadigital.uel.br/document/?code=vtls000124161390.pdf123456789/2702 - Mestrado - Patologia ExperimentalORIGINAL390.pdfapplication/pdf692665https://repositorio.uel.br/bitstreams/4136f441-52bb-491f-b107-c6d38d660836/download095c4f1ebe82cc35784bbe4831bc2e7bMD51LICENCElicence.txttext/plain263https://repositorio.uel.br/bitstreams/c4fb25f9-76a9-4f14-b5be-322ca44cb1ff/download753f376dfdbc064b559839be95ac5523MD52TEXT390.pdf.txt390.pdf.txtExtracted texttext/plain59134https://repositorio.uel.br/bitstreams/634e2534-0bc8-47cb-9e9a-ed9aec298178/download777c4de8ba2ccc35bfe61427bdf05074MD53THUMBNAIL390.pdf.jpg390.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg3904https://repositorio.uel.br/bitstreams/e5832893-d600-4c75-8d6b-1c746dac4217/downloadfa3394ec7ab35e392884d6a1ed9602b1MD54123456789/110602024-07-12 01:19:37.742open.accessoai:repositorio.uel.br:123456789/11060https://repositorio.uel.brBiblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.bibliotecadigital.uel.br/PUBhttp://www.bibliotecadigital.uel.br/OAI/oai2.phpbcuel@uel.br||opendoar:2024-07-12T04:19:37Repositório Institucional da UEL - Universidade Estadual de Londrina (UEL)false
dc.title.pt_BR.fl_str_mv Resposta imune humoral em camundongos à sub-fração obtida por digestão enzimática (tripsina) do antígeno de alta massa molecular de Paracoccidioides brasiliensis
title Resposta imune humoral em camundongos à sub-fração obtida por digestão enzimática (tripsina) do antígeno de alta massa molecular de Paracoccidioides brasiliensis
spellingShingle Resposta imune humoral em camundongos à sub-fração obtida por digestão enzimática (tripsina) do antígeno de alta massa molecular de Paracoccidioides brasiliensis
Gerez, Juliana Rubira
Paracoccidioides brasiliensis
Paracoccidioidomicose
Tripsina
Resposta imune
Immune response
Trypsin
title_short Resposta imune humoral em camundongos à sub-fração obtida por digestão enzimática (tripsina) do antígeno de alta massa molecular de Paracoccidioides brasiliensis
title_full Resposta imune humoral em camundongos à sub-fração obtida por digestão enzimática (tripsina) do antígeno de alta massa molecular de Paracoccidioides brasiliensis
title_fullStr Resposta imune humoral em camundongos à sub-fração obtida por digestão enzimática (tripsina) do antígeno de alta massa molecular de Paracoccidioides brasiliensis
title_full_unstemmed Resposta imune humoral em camundongos à sub-fração obtida por digestão enzimática (tripsina) do antígeno de alta massa molecular de Paracoccidioides brasiliensis
title_sort Resposta imune humoral em camundongos à sub-fração obtida por digestão enzimática (tripsina) do antígeno de alta massa molecular de Paracoccidioides brasiliensis
author Gerez, Juliana Rubira
author_facet Gerez, Juliana Rubira
author_role author
dc.contributor.banca.pt_BR.fl_str_mv Nakamura, Celso Vataru
Venâncio, Emerson José
dc.contributor.author.fl_str_mv Gerez, Juliana Rubira
dc.contributor.authorID.fl_str_mv 68d6f6c7-3d78-4e7a-af80-7dc131e061a4
dc.contributor.advisor1ID.fl_str_mv 99be7295-863f-4f3f-97ca-f870b6d1fbbb
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv Itano, Eiko Nakagawa [Orientador]
contributor_str_mv Itano, Eiko Nakagawa [Orientador]
dc.subject.por.fl_str_mv Paracoccidioides brasiliensis
Paracoccidioidomicose
Tripsina
Resposta imune
Immune response
Trypsin
topic Paracoccidioides brasiliensis
Paracoccidioidomicose
Tripsina
Resposta imune
Immune response
Trypsin
description Resumo: Paracoccidioidomicose (PCM) é uma micose sistêmica causada pelo fungo dimórfico Paracoccidioides brasiliensis que libera diversos componentes imunogênicos, dentre eles o de alta massa molecular (hMM) O objetivo desse trabalho foi obter a sub-fração do componente de alta massa molecular por digestão com tripsina, assim como avaliar a resposta imune humoral a este componente na paracoccidioidomicose experimental Inicialmente a fração hMM (~38KDa) foi obtida por cromatografia em Coluna de Sephadex G - 2 e a seguir tratada com tripsina por 6', 12', 15' a 37ºC e re-analisada por Cromatografia em Coluna de Sephadex G 1 A sub - fração F17 -II selecionada foi analisada por SDS - PAGE e utilizada na imunização de camundongos BALB/c A seguir foi analisado o nível de IgG anti-gp43 , anti-hMM e gp43 solúvel nos grupos experimentais de camundongos normal, imunizado, imunizado/infectado e infectado utilizando ELISA indireto e ELISA de captura Os resultados obtidos demonstraram nível significativo de IgG anti - sub-fração F17 -II 28 e 56 dias pós imunização No entanto não houve diferença significativa no nível de IgG anti-sub-fração F17 -II entre o grupo imunizado/infectado e infectado Foi observado nível elevado de IgG anti - gp43 ou anti - hMM nos animais infectados em relação ao controle mas não entre infectados e imunizados/infectados Concluímos pelo trabalho que a fração hMM de P brasiliensis apresenta suscetibilidade à ação da enzima tripsina, podendo gerar dois fragmentos de massa molecular distintas em função do tempo de incubação A F17-II resultante da digestão com tripsina apresenta massa molecular similar a gp43 e não é capaz de potencializar a resposta imune humoral na PCM experimental em camundongos por processo de imunização
publishDate 2024
dc.date.defesa.pt_BR.fl_str_mv 06.05.2007
dc.date.created.fl_str_mv 2007.00
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2024-05-01T13:09:45Z
dc.date.available.fl_str_mv 2024-05-01T13:09:45Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://repositorio.uel.br/handle/123456789/11060
url https://repositorio.uel.br/handle/123456789/11060
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.confidence.fl_str_mv -1
-1
dc.relation.coursedegree.pt_BR.fl_str_mv Mestrado
dc.relation.coursename.pt_BR.fl_str_mv Patologia Experimental
dc.relation.departament.pt_BR.fl_str_mv Centro de Ciências Biológicas
dc.relation.ppgname.pt_BR.fl_str_mv Programa de Pós-Graduação em Patologia Experimental
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.coverage.spatial.pt_BR.fl_str_mv Londrina
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UEL
instname:Universidade Estadual de Londrina (UEL)
instacron:UEL
instname_str Universidade Estadual de Londrina (UEL)
instacron_str UEL
institution UEL
reponame_str Repositório Institucional da UEL
collection Repositório Institucional da UEL
bitstream.url.fl_str_mv https://repositorio.uel.br/bitstreams/4136f441-52bb-491f-b107-c6d38d660836/download
https://repositorio.uel.br/bitstreams/c4fb25f9-76a9-4f14-b5be-322ca44cb1ff/download
https://repositorio.uel.br/bitstreams/634e2534-0bc8-47cb-9e9a-ed9aec298178/download
https://repositorio.uel.br/bitstreams/e5832893-d600-4c75-8d6b-1c746dac4217/download
bitstream.checksum.fl_str_mv 095c4f1ebe82cc35784bbe4831bc2e7b
753f376dfdbc064b559839be95ac5523
777c4de8ba2ccc35bfe61427bdf05074
fa3394ec7ab35e392884d6a1ed9602b1
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
MD5
MD5
MD5
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UEL - Universidade Estadual de Londrina (UEL)
repository.mail.fl_str_mv bcuel@uel.br||
_version_ 1862739618672148480

Registros relacionados