Efeito do óleo essencial de Cymbopogon citratus em zebrafish (Danio rerio)

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2023
Autor(a) principal: Silva, Kiara Cândido Duarte da lattes
Orientador(a): Murgas, Luis David Solis
Banca de defesa: Machado, Mônica Rodrigues Ferreira, Vieira, Larissa Fonseca Andrade, Pinto, Juliana Tensol
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal de Lavras
Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-graduação em Ciências Veterinárias
Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias
Departamento: Departamento de Medicina Veterinária
País: brasil
Palavras-chave em Português:
Área do conhecimento CNPq:
Link de acesso: https://repositorio.ufla.br/handle/1/56311
Resumo: A Cymbopogon citratus DC. Stapf (Poaceae), é popularmente conhecida como capim-limão e vários atributos dessa planta já foram relatados. No entanto, o uso de seu óleo essencial (OE) em embriões e larvas de zebrafish (Danio rerio) ainda é limitado. Os objetivos do presente estudo foram avaliar o potencial tóxico, anti-inflamatório, através da regeneração da nadadeira caudal, recrutamento de neutrófilos e avaliação do efeito protetor do OE da C. citratus contra o estresse oxidativo, apoptose e espécies reativas de oxigênio induzido por peróxido de hidrogênio (H2O2) no zebrafish. As concentrações analisadas para os ensaios de embriotoxicidade foram 50, 25, 12,5, 6,25, 3,12, 1,56, 0,78 e 0,39 μg/mL, diluídas em dimetil sulfóxido (DMSO) a 0,5%. Vinte embriões foram submetidos aos seus tratamentos em placas de 96 poços e analisados até 120 horas pós-fertilização (hpf). Um pool de quarenta larvas por tratamento expostas por até 96 hpf foram utilizadas para as análises das enzimas antioxidantes, superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationa s-transferase (GST). Para a identificação de células apoptóticas, foram utilizadas 20 larvas de 72 hpf, que foram coradas com laranja de acridina (AO) por 20 minutos. Para os demais testes, foram testadas cinco concentrações (6,25; 3,12; 1,56; 0,78; 0,39 μg/mL) e seus efeitos foram analisados na migração de neutrófilos, regeneração da nadadeira caudal, atividade das enzimas, apoptose e na produção de espécies reativas de oxigênio (ROS), em embriões e larvas de zebrafish expostos ao H2O2. O OE apresentou toxicidade nas concentrações de 50 e 25 μg/mL a 24 e 72 hpf, respectivamente. A concentração de 12,5 μg/mL causou mortalidade de 70%. A concentração de 6,25 μg/mL causou efeitos teratogênicos. Em comparação com o controle, a atividade de SOD apresentou uma redução significativa em concentrações superiores a 0,78 μg/mL, e concentrações superiores a 1,56 μg/mL resultaram em uma redução significativa na atividade de CAT. Houve uma redução significativa na migração de neutrófilos em todos os tratamentos com OE, quando comparados com os do grupo controle. As maiores concentrações de OE (3,12 e 6,25 μg/ml) apresentaram uma redução significativa do processo de regeneração da nadadeira caudal. Além disso, foi observada uma redução significativa da atividade da SOD em todas as concentrações do OE. A atividade da CAT foi significativamente menor no grupo 3,12 μg/ml. Por outro lado, a atividade da GST aumentou significativamente nos grupos 0,78 e 1,56μg/ml, quando comparados ao grupo controle. Não houve diferença significativa na produção de ROS. Uma redução da apoptose celular foi observada em todas as concentrações do OE, quando comparadas com o controle H2O2. Os resultados dos estudos indicam que o OE da C. citratus nas maiores concentrações causou efeitos tóxicos e teratogênicos em embriões e larvas de peixe-zebra. Porém, em menor concentração, o OE não apresentou toxicidade. Além disso, OE possui potencial para efeito anti-inflamatório e proteção contra formação de radicais livres.
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spelling 2023-03-22T16:09:07Z2023-03-22T16:09:07Z2023-01-302023-03-22SILVA, K. C. D. da. Efeito do óleo essencial de Cymbopogon citratus em zebrafish (Danio rerio). 2023. 102 p. Dissertação (Mestrado em Ciências Veterinárias)–Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2023.https://repositorio.ufla.br/handle/1/56311A Cymbopogon citratus DC. Stapf (Poaceae), é popularmente conhecida como capim-limão e vários atributos dessa planta já foram relatados. No entanto, o uso de seu óleo essencial (OE) em embriões e larvas de zebrafish (Danio rerio) ainda é limitado. Os objetivos do presente estudo foram avaliar o potencial tóxico, anti-inflamatório, através da regeneração da nadadeira caudal, recrutamento de neutrófilos e avaliação do efeito protetor do OE da C. citratus contra o estresse oxidativo, apoptose e espécies reativas de oxigênio induzido por peróxido de hidrogênio (H2O2) no zebrafish. As concentrações analisadas para os ensaios de embriotoxicidade foram 50, 25, 12,5, 6,25, 3,12, 1,56, 0,78 e 0,39 μg/mL, diluídas em dimetil sulfóxido (DMSO) a 0,5%. Vinte embriões foram submetidos aos seus tratamentos em placas de 96 poços e analisados até 120 horas pós-fertilização (hpf). Um pool de quarenta larvas por tratamento expostas por até 96 hpf foram utilizadas para as análises das enzimas antioxidantes, superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationa s-transferase (GST). Para a identificação de células apoptóticas, foram utilizadas 20 larvas de 72 hpf, que foram coradas com laranja de acridina (AO) por 20 minutos. Para os demais testes, foram testadas cinco concentrações (6,25; 3,12; 1,56; 0,78; 0,39 μg/mL) e seus efeitos foram analisados na migração de neutrófilos, regeneração da nadadeira caudal, atividade das enzimas, apoptose e na produção de espécies reativas de oxigênio (ROS), em embriões e larvas de zebrafish expostos ao H2O2. O OE apresentou toxicidade nas concentrações de 50 e 25 μg/mL a 24 e 72 hpf, respectivamente. A concentração de 12,5 μg/mL causou mortalidade de 70%. A concentração de 6,25 μg/mL causou efeitos teratogênicos. Em comparação com o controle, a atividade de SOD apresentou uma redução significativa em concentrações superiores a 0,78 μg/mL, e concentrações superiores a 1,56 μg/mL resultaram em uma redução significativa na atividade de CAT. Houve uma redução significativa na migração de neutrófilos em todos os tratamentos com OE, quando comparados com os do grupo controle. As maiores concentrações de OE (3,12 e 6,25 μg/ml) apresentaram uma redução significativa do processo de regeneração da nadadeira caudal. Além disso, foi observada uma redução significativa da atividade da SOD em todas as concentrações do OE. A atividade da CAT foi significativamente menor no grupo 3,12 μg/ml. Por outro lado, a atividade da GST aumentou significativamente nos grupos 0,78 e 1,56μg/ml, quando comparados ao grupo controle. Não houve diferença significativa na produção de ROS. Uma redução da apoptose celular foi observada em todas as concentrações do OE, quando comparadas com o controle H2O2. Os resultados dos estudos indicam que o OE da C. citratus nas maiores concentrações causou efeitos tóxicos e teratogênicos em embriões e larvas de peixe-zebra. Porém, em menor concentração, o OE não apresentou toxicidade. Além disso, OE possui potencial para efeito anti-inflamatório e proteção contra formação de radicais livres.Cymbopogon citratus DC. Stapf (Poaceae), is popularly known as lemongrass and several attributes of this plant have been reported. However, the use of its essential oil (EO) in zebrafish (Danio rerio) embryos and larvae is still limited. The objectives of the present study were to evaluate the toxic potential, anti-inflammatory, through caudal fin regeneration, neutrophil recruitment and evaluation of the protective effect of C. citratus EO against oxidative stress, apoptosis and hydrogen peroxide (H2O2)-induced reactive oxygen species in zebrafish. The concentrations analyzed for embryotoxicity assays were 50, 25, 12.5, 6.25, 3.12, 1.56, 0.78 and 0.39 μg/mL, diluted in 0.5% dimethyl sulfoxide (DMSO). Twenty embryos were subjected to their treatment in 96-well plates and analyzed up to 120 hours post-fertilization (hpf). A pool of forty larvae per treatment exposed for up to 96 hpf were used for the analyses of the antioxidant enzymes, superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione s-transferase (GST). For the identification of apoptotic cells, 20 72 hpf larvae were used and stained with acridine orange (AO) for 20 minutes. For the other tests, five concentrations (6.25; 3.12; 1.56; 0.78; 0.39 μg/mL) were tested and their effects were analyzed on neutrophil migration, caudal fin regeneration, enzyme activity, apoptosis, and the production of reactive oxygen species (ROS), in zebrafish embryos and larvae exposed to H2O2. The EO showed toxicity at concentrations of 50 and 25 μg/mL at 24 and 72 hpf, respectively. The concentration of 12.5 μg/mL caused 70% mortality. The concentration of 6.25 μg/mL caused teratogenic effects. Compared to control, SOD activity showed a significant reduction at concentrations higher than 0.78 μg/mL, and concentrations higher than 1.56 μg/mL resulted in a significant reduction in CAT activity. There was a significant reduction in neutrophil migration in all EO treatments when compared to the control group. The highest concentrations of EO (3.12 and 6.25 μg/mL) showed a significant reduction in the process of caudal fin regeneration. In addition, a significant reduction of SOD activity was observed in all concentrations of the EO. CAT activity was significantly lower in the 3.12 μg/ml group. On the other hand, GST activity was significantly increased in the 0.78 and 1.56μg/ml groups when compared to the control group. There was no significant difference in ROS production. A reduction in cell apoptosis was observed in all concentrations of OE when compared to the H2O2 control. The results of the studies indicate that the EO of C. citratus at the highest concentrations caused toxic and teratogenic effects in zebra fish embryos and larvae. However, at lower concentration, OE showed no toxicity. In addition, EO has potential for anti-inflammatory effect and protection against free radical formation.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Universidade Federal de LavrasPrograma de Pós-graduação em Ciências VeterináriasPrograma de Pós-Graduação em Ciências VeterináriasUFLAbrasilDepartamento de Medicina VeterináriaPisciculturaPlantas medicinaisCapim-limãoToxicidadeRegeneraçãoRadicais LivresMedicinal plantsLemongrassToxicityRegenerationFree radicalsEfeito do óleo essencial de Cymbopogon citratus em zebrafish (Danio rerio)info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisMurgas, Luis David SolisCastro, Tássia Flávia DiasCarneiro, William FrancoMachado, Mônica Rodrigues FerreiraVieira, Larissa Fonseca AndradePinto, Juliana Tensolhttp://lattes.cnpq.br/0120899403897446Silva, Kiara Cândido Duarte dainfo:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da UFLAinstname:Universidade Federal de Lavras (UFLA)instacron:UFLALICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-8956https://repositorio.ufla.br/bitstreams/f11d43b2-5f93-454c-8e7c-cd96b54ffd9f/download5ea4a165b7202cbf475be400d2e16893MD51falseAnonymousREADORIGINALDISSERTAÇÃO_Efeito do óleo essencial de Cymbopogon citratus em zebrafish (Danio rerio).pdfDISSERTAÇÃO_Efeito do óleo essencial de Cymbopogon citratus em zebrafish (Danio rerio).pdfapplication/pdf1949621https://repositorio.ufla.br/bitstreams/ac6c09ef-3184-4156-b0c5-d6d0391ecc7b/download8e33690527bfbe7bdb8c8e3e4d2d879fMD52trueAnonymousREADTEXTDISSERTAÇÃO_Efeito do óleo essencial de Cymbopogon citratus em zebrafish (Danio rerio).pdf.txtDISSERTAÇÃO_Efeito do óleo essencial de Cymbopogon citratus em zebrafish (Danio rerio).pdf.txtExtracted texttext/plain101832https://repositorio.ufla.br/bitstreams/e7547589-d61c-4fb8-af52-d4fb2a70083f/downloadf3d67c1a2a73bd9f9f760c0f9e811d57MD53falseAnonymousREADTHUMBNAILDISSERTAÇÃO_Efeito do óleo essencial de Cymbopogon citratus em zebrafish (Danio rerio).pdf.jpgDISSERTAÇÃO_Efeito do óleo essencial de Cymbopogon citratus em zebrafish (Danio rerio).pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg2763https://repositorio.ufla.br/bitstreams/72f309fb-7160-4215-b65f-1b0165231526/download72c3656a09880ff2780bcd2dc286537aMD54falseAnonymousREAD1/563112025-08-27 18:01:01.316open.accessoai:repositorio.ufla.br:1/56311https://repositorio.ufla.brRepositório InstitucionalPUBhttps://repositorio.ufla.br/server/oai/requestnivaldo@ufla.br || repositorio.biblioteca@ufla.bropendoar:2025-08-27T21:01:01Repositório Institucional da UFLA - Universidade Federal de Lavras (UFLA)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