Utilização de esporos de Bacillus toyonensis como adjuvante de vacina recombinante de subunidade contra Herpesvírus Bovino tipo 5
| Ano de defesa: | 2021 |
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| Tipo de documento: | Dissertação |
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| Instituição de defesa: |
Universidade Federal de Pelotas
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| Programa de Pós-Graduação: |
Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia
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| Departamento: |
Centro de Desenvolvimento Tecnológico
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| País: |
Brasil
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| Palavras-chave em Português: | |
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Resumo: | Adjuvantes vacinais são compostos que potencializam a resposta imune. Esporos de bactérias do gênero Bacillus são capazes de potencializar a resposta imune de vacinas. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito adjuvante de esporos de Bacillus toyonensis em uma vacina experimental, bem como realizar uma uma revisão sistemática de estudos que utilizaram esporos de bactérias do gênero Bacillus como adjuvantes de diferentes vacinas testadas em modelo animal. Esporos de Bacillus toyonensis, vivos e inativados, foram utilizados em uma vacina contendo a glicoproteína D recombinante (rgD) de Herpesvírus Bovino tipo 5 (BoHV-5). Seis grupos experimentais de camundongos foram vacinados por via subcutânea no dia 0 e receberam um reforço no dia 21 do experimento, com as seguintes formulações vacinais: rgD (40 μg) + esporos vivos (2 x 109 UFC); rgD + esporos mortos (2 x 109 UFC); rgD + esporos vivos + alumen (2 mg); rgD + esporos mortos + alumen; rgD + alumen e rgD + PBS. Foram observados níveis significativos (p<0,05) de anticorpos IgG totais de até 7.5 vezes superiores no grupo que recebeu esporos vivos associados a rgD e adsorvidos ao alumen e 12 vezes superiores no grupo que recebeu esporos inativados associados a rgD e adsorvidos ao alumen, quando comparados ao grupo rgD + alumen (controle). Foram detectados níveis significantes de IgG1 de ~8 vezes, IgG2a de ~~16 vezes e IgG2b de ~8 vezes superiores (p<0,05), nos camundongos que receberam esporos vivos ou inativados adsorvidos ao alumen na formulação da vacina, quando comparados ao grupo rgD + alumen. Os grupos de animais que receberam esporos vivos ou inativados adsorvidos ao alumen também apresentaram níveis de anticorpos neutralizantes contra o BoHV-5 e níveis significativos de transcrição de mRNA de IFN-γ de até 66 vezes, IL17 de 14 vezes e IL12 de 2.8 vezes superiores (p<0,05), quando comparados ao grupo rgD + alumen. Estudos encontrados na revisão sistemática também mostraram que a vacinação com as formulações contendo esporos de B. subtilis, B. toyonensis e B. atrophaeus induziu o desenvolvimento de uma resposta imune humoral e celular nos animais, com significante produção de anticorpos e expressão de citocinas, além da estimulação e proliferação de células imunes. Em conclusão, nossos dados demonstraram que os esporos de bactérias do gênero Bacillus possuem propriedades imunomoduladoras e são capazes de melhorar a resposta de vacinas, se destacando como componentes promissores a serem utilizados como adjuvantes em formulações vacinais. |
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2023-01-06T16:01:50Z2023-01-052023-01-06T16:01:50Z2021-05-25MAUBRIGADES, Lucas Reichert. Utilização de esporos de Bacillus toyonensis como adjuvante de vacina recombinante de subunidade contra Herpesvírus Bovino tipo 5. 2021. 96f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) - Centro de Desenvolvimento Tecnológico, Universidade Federal de Pelotas. Pelotas, 2021.http://guaiaca.ufpel.edu.br/handle/prefix/8907Adjuvantes vacinais são compostos que potencializam a resposta imune. Esporos de bactérias do gênero Bacillus são capazes de potencializar a resposta imune de vacinas. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito adjuvante de esporos de Bacillus toyonensis em uma vacina experimental, bem como realizar uma uma revisão sistemática de estudos que utilizaram esporos de bactérias do gênero Bacillus como adjuvantes de diferentes vacinas testadas em modelo animal. Esporos de Bacillus toyonensis, vivos e inativados, foram utilizados em uma vacina contendo a glicoproteína D recombinante (rgD) de Herpesvírus Bovino tipo 5 (BoHV-5). Seis grupos experimentais de camundongos foram vacinados por via subcutânea no dia 0 e receberam um reforço no dia 21 do experimento, com as seguintes formulações vacinais: rgD (40 μg) + esporos vivos (2 x 109 UFC); rgD + esporos mortos (2 x 109 UFC); rgD + esporos vivos + alumen (2 mg); rgD + esporos mortos + alumen; rgD + alumen e rgD + PBS. Foram observados níveis significativos (p<0,05) de anticorpos IgG totais de até 7.5 vezes superiores no grupo que recebeu esporos vivos associados a rgD e adsorvidos ao alumen e 12 vezes superiores no grupo que recebeu esporos inativados associados a rgD e adsorvidos ao alumen, quando comparados ao grupo rgD + alumen (controle). Foram detectados níveis significantes de IgG1 de ~8 vezes, IgG2a de ~~16 vezes e IgG2b de ~8 vezes superiores (p<0,05), nos camundongos que receberam esporos vivos ou inativados adsorvidos ao alumen na formulação da vacina, quando comparados ao grupo rgD + alumen. Os grupos de animais que receberam esporos vivos ou inativados adsorvidos ao alumen também apresentaram níveis de anticorpos neutralizantes contra o BoHV-5 e níveis significativos de transcrição de mRNA de IFN-γ de até 66 vezes, IL17 de 14 vezes e IL12 de 2.8 vezes superiores (p<0,05), quando comparados ao grupo rgD + alumen. Estudos encontrados na revisão sistemática também mostraram que a vacinação com as formulações contendo esporos de B. subtilis, B. toyonensis e B. atrophaeus induziu o desenvolvimento de uma resposta imune humoral e celular nos animais, com significante produção de anticorpos e expressão de citocinas, além da estimulação e proliferação de células imunes. Em conclusão, nossos dados demonstraram que os esporos de bactérias do gênero Bacillus possuem propriedades imunomoduladoras e são capazes de melhorar a resposta de vacinas, se destacando como componentes promissores a serem utilizados como adjuvantes em formulações vacinais.Vaccinal adjuvants are compounds that potentiate the immune response. Bacterial spores of the Bacillus genus are able to enhance the immune response when used in vaccines. The aim of this work was to evaluate the use of Bacillus toyonensis spores as an adjuvant to an experimental vaccine as well as conducting a systematic review of studies that used Bacillus spores as adjuvants to different vaccines tested in animal model. Live and heat-killed Bacillus toyonensis spores were used in a vaccine containing the recombinant glycoprotein D (rgD) of Bovine Herpesvirus type 5 (BoHV-5). Six experimental groups of mice were vaccinated subcutaneously on day 0 and boosted on day 21 of the experiment, with the following vaccine formulations: rgD (40 μg) + live spores (2x109 CFU); rgD + inactivated spores (2 x 109 UFC); rgD + live spores + alum (2 mg); rgD + inactivated spores + alum; rgD + alum and rgD + PBS. Significant levels (p <0.05) of total IgG antibodies were observed up to 7.5 times higher in the group that received live spores associated with rgD and adsorbed to alum and 12 times higher in the group that received inactivated spores associated with rgD and adsorbed to alum, when compared to the rgD + alum (control) group. Significant levels of IgG1 of ~8-fold, IgG2a of ~~16-fold and IgG2b of ~8-fold (p<0.05) were detected in mice that received live or inactivated spores adsorbed to alum in the vaccine formulation, when compared to the rgD + alum group. Groups of animals that received live or inactivated spores adsorbed to alum also presented levels of neutralizing antibodies against BoHV-5 and significant levels of IFN-γ mRNA transcription up to 66-fold, IL17 of 14-fold and IL12 of 2.8-fold (p<0.05), when compared to the rgD + alum group. Studies found in the systematic review also showed that vaccination with formulations containing spores of B. subtilis, B. toyonensis, and B. atrophaeus induced the development of a humoral and cellular immune response in the animals, with significant production of antibodies and expression of cytokines, in addition to stimulation and proliferation of immune cells. In conclusion, our data demonstrated that the Bacillus spores have immunomodulatory properties and are capable of improving the response of vaccines, standing out as promising components to be used as adjuvants in vaccine formulations.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESporUniversidade Federal de PelotasPrograma de Pós-Graduação em BiotecnologiaUFPelBrasilCentro de Desenvolvimento TecnológicoCNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA::CLINICA E CIRURGIA ANIMAL::FARMACOLOGIA E TERAPEUTICA ANIMALBacillusImunomodulaçãoAlumenAnticorposCitocinasImmunomodulationAlumAntibodiesCytokinesUtilização de esporos de Bacillus toyonensis como adjuvante de vacina recombinante de subunidade contra Herpesvírus Bovino tipo 5Utilization of Bacillus toyonensis spores as adjuvant of a recombinant subunit vaccine against Bovine Herpesvirus type 5info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesishttp://lattes.cnpq.br/3825214385137783http://lattes.cnpq.br/0198257253890399Santos, Francisco Denis Souzahttp://lattes.cnpq.br/1463872755638805Leite, Fabio Pereira LeivasMaubrigades, Lucas ReichertMAUBRIGADES, Lucas Reichert. Utilização de esporos de Bacillus toyonensis como adjuvante de vacina recombinante de subunidade contra Herpesvírus Bovino tipo 5. 2021. 96f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) - Centro de Desenvolvimento Tecnológico, Universidade Federal de Pelotas. Pelotas, 2021.info:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFPel - Guaiacainstname:Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)instacron:UFPELTEXTDissertacao_Lucas_Reichert_Maubrigades.pdf.txtDissertacao_Lucas_Reichert_Maubrigades.pdf.txtExtracted texttext/plain198922http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8907/6/Dissertacao_Lucas_Reichert_Maubrigades.pdf.txt427be1de3bca758f0cf50a0a857ee8b7MD56open accessTHUMBNAILDissertacao_Lucas_Reichert_Maubrigades.pdf.jpgDissertacao_Lucas_Reichert_Maubrigades.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1417http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8907/7/Dissertacao_Lucas_Reichert_Maubrigades.pdf.jpg561941bd0b8701a2a9d942cf510699f3MD57open accessORIGINALDissertacao_Lucas_Reichert_Maubrigades.pdfDissertacao_Lucas_Reichert_Maubrigades.pdfapplication/pdf1314806http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8907/1/Dissertacao_Lucas_Reichert_Maubrigades.pdf8d76706732bacc048dc45711fbf653f9MD51open accessCC-LICENSElicense_urllicense_urltext/plain; charset=utf-849http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8907/2/license_url4afdbb8c545fd630ea7db775da747b2fMD52open accesslicense_textlicense_texttext/html; charset=utf-80http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8907/3/license_textd41d8cd98f00b204e9800998ecf8427eMD53open accesslicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-80http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8907/4/license_rdfd41d8cd98f00b204e9800998ecf8427eMD54open accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81866http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8907/5/license.txt43cd690d6a359e86c1fe3d5b7cba0c9bMD55open accessprefix/89072023-07-17 20:44:50.545open accessoai:guaiaca.ufpel.edu.br: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ório InstitucionalPUBhttp://repositorio.ufpel.edu.br/oai/requestrippel@ufpel.edu.br || repositorio@ufpel.edu.br || aline.batista@ufpel.edu.bropendoar:2023-07-17T23:44:50Repositório Institucional da UFPel - Guaiaca - Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)false |
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