Novos adjuvantes: determinação do perfil imunomodulador do polissacarídeo xantana produzido por Xanthomonas arboricola pv. pruni 106

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2017
Autor(a) principal: Schuch, Rodrigo Andrade
Orientador(a): Hartwig, Daiane Drawanz
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal de Pelotas
Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Brasil
Palavras-chave em Português:
Área do conhecimento CNPq:
Link de acesso: http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/handle/prefix/18478
Resumo: O sucesso na produção de vacinas seguras, eficazes e que geram memória imunológica está diretamente relacionado com a característica do adjuvante, responsável por aumentar e/ou modular a resposta imune. Vários compostos apresentam atividade adjuvante, incluindo polissacarídeos, os quais desempenham papeis importantes na resposta imune. Dentre eles, destacamos a goma xantana, um polissacarídeo que é produzido pelo gênero Xanthomonas spp., uma bactéria fitopatogênica. Esse polissacarídeo vêm sendo explorado por possuir propriedades adjuvante. Porém, aspectos relativos ao seu mecanismo imunomodulador permanecem inexplorados. Assim, o presente estudo avaliou a resposta imunológica induzida pela goma xantana associada com antígeno proteico modelo, a ovalbumina (OVA), em camundongos BALB/c imunizados subcutaneamente. Sete animais por grupo foram divididos em: OVA-xantana (0,5% v/v), OVA-Alhydrogel (15% v/v), OVA- salina e salina. Após o regime de imunização, foi avaliada a produção de anticorpos (IgG1, IgG2a, IgG2b, e IgG3) e citocina IFN-γ em esplenócitos através de ensaio ELISA indireto. Além disso, foi investigada a citotoxicidade in vitro da xantana (0,1 a 1% v/v) em linhagem celular de fibroblastos de embrião de camundongo NIH/3T3, pelo ensaio de MTT e ensaio de captura de iodeto de propídio. Os camundongos imunizados com ovalbumina-xantana exibiram maiores respostas de anticorpo IgG1 comparado aos imunizados com ovalbumina sem adjuvante (P<0,05). Além disso, o polissacarídeo xantana foi capaz de aumentar a produção de IFN-γ (P<0,05) e não apresentou efeitos de citotoxicidade em células de fibroblastos de camundongos NIH/3T3, demonstrando o potencial da utilização da xantana como adjuvante vacinal combinado com antígenos proteicos.
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Porém, aspectos relativos ao seu mecanismo imunomodulador permanecem inexplorados. Assim, o presente estudo avaliou a resposta imunológica induzida pela goma xantana associada com antígeno proteico modelo, a ovalbumina (OVA), em camundongos BALB/c imunizados subcutaneamente. Sete animais por grupo foram divididos em: OVA-xantana (0,5% v/v), OVA-Alhydrogel (15% v/v), OVA- salina e salina. Após o regime de imunização, foi avaliada a produção de anticorpos (IgG1, IgG2a, IgG2b, e IgG3) e citocina IFN-γ em esplenócitos através de ensaio ELISA indireto. Além disso, foi investigada a citotoxicidade in vitro da xantana (0,1 a 1% v/v) em linhagem celular de fibroblastos de embrião de camundongo NIH/3T3, pelo ensaio de MTT e ensaio de captura de iodeto de propídio. Os camundongos imunizados com ovalbumina-xantana exibiram maiores respostas de anticorpo IgG1 comparado aos imunizados com ovalbumina sem adjuvante (P<0,05). Além disso, o polissacarídeo xantana foi capaz de aumentar a produção de IFN-γ (P<0,05) e não apresentou efeitos de citotoxicidade em células de fibroblastos de camundongos NIH/3T3, demonstrando o potencial da utilização da xantana como adjuvante vacinal combinado com antígenos proteicos.The successful production of new, safe and effective vaccines that generate immunological memory is directly related to adjuvant feature, which is responsible for increasing and/or modulating the immune response. Several compounds display adjuvant activity, including carbohydrates. One such carbohydrate is xanthan gum, a polysaccharide that is produced by the plant pathogenic bacterium Xanthomonas spp. This polysaccharide has been explored for having adjuvant properties. However, aspects related to its immunomodulatory mechanism remain unexplored. This study evaluated the immune response induced by xanthan gum associated with ovalbumin (OVA) in BALB/c mice, that were subcutaneously immunized. Seven animals were divided into: OVA-xanthan (0.5% v/v), OVA-Alhydrogel (15% v/v), OVA-saline and saline. After the immunization regimen, the antibody production (IgG1, IgG2a, IgG2b, and IgG3) and assessed the levels of INF-γ in the splenocyte culture using ELISA indirect. Furthermore, we investigated in vitro cytotoxicity of xanthan (0.1-1% v/v) in the embryo fibroblasts cell line of the NIH/3T3 mouse by MTT assay and propidium iodide uptake assay. The mice immunized with ovalbumin plus xanthan gum exhibited higher antibody IgG1 responses than those immunized with the ovalbumin without adjuvant. Furthermore, the xanthan polysaccharide was capable of increasing the immunogenicity of antigens by producing INF-γ and did not exhibit cytotoxicity effects in NIH/3T3 mouse fibroblast cells, demonstrating the potential of using xanthan as a vaccine adjuvant combined with protein antigens.Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPqporUniversidade Federal de PelotasPrograma de Pós-Graduação em BiotecnologiaUFPelBrasilCC BY-NC-SAinfo:eu-repo/semantics/openAccessCIENCIAS BIOLOGICASIMUNOLOGIAVacinasGoma xantanaOvalbuminaResposta imunológicaVaccinesXanthan gumOvalbuminImmune responseNovos adjuvantes: determinação do perfil imunomodulador do polissacarídeo xantana produzido por Xanthomonas arboricola pv. pruni 106New adjuvants: determination of the immunomodulatory profile of xanthan polysaccharide produced by Xanthomonas arborícola pv. pruni 106info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesishttp://lattes.cnpq.br/7659534294233770https://orcid.org/0000-0003-3604-0832http://lattes.cnpq.br/0131111340559161Hartwig, Daiane DrawanzSchuch, Rodrigo Andradereponame:Repositório Institucional da UFPel - Guaiacainstname:Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)instacron:UFPELORIGINALDissertação Rodrigo Andrade Schuch.pdfDissertação Rodrigo Andrade Schuch.pdfapplication/pdf2338698http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/18478/1/Disserta%c3%a7%c3%a3o%20Rodrigo%20Andrade%20Schuch.pdf4ba5e8bce0b4f88e55cb2109c75b6ed9MD51open accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; 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