Investigação do efeito de cloroquina e metformina no reposicionamento de fármacos para neoplasia mieloproliferativa

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Silva, Antonio Bruno Alves da
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Autofagia; Autophagy; Chloroquine; Cloroquina; Hematologic neoplasm; JAK2; Metformin; Metformina; Neoplasia hematológica; Policitemia vera; Polycythemia vera; Ruxolitinib; Ruxolitinibe
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17138/tde-04042025-095928/

Policitemia vera, trombocitemia essencial e mielofibrose primária são neoplasia mieloproliferativas (NMP) clássicas que compartilham ativação da via JAK/STAT, como consequência de mutação em JAK2, MPL ou CALR. Leucemia mieloide crônica (LMC) é o modelo de NMP com BCR::ABL1 e tem o risco de evolução para leucemia aguda. O ruxolitinibe é um inibidor seletivo de JAK1/2, reduz sintomas clínicos, mas não afeta a célula-tronco hematopoética (CTH) e não altera a história natural da doença. A cloroquina (CQ) é utilizada para o tratamento de malária e tem o efeito de inibir a autofagia. A metformina é um hipoglicemiante utilizada no tratamento de diabetes mellitus tipo 2 e inibe o complexo 1 da cadeia energética mitocondrial, aumentando a razão AMP/ATP. O venetoclax é um inibidor seletivo da proteína BCL2. Em células leucêmicas, o aumento da expressão da proteína BCL2 é relacionado ao aumento no consumo de oxigênio e aumento da fosforilação oxidativa (OXPHOS). O objetivo deste trabalho foi investigar o efeito combinado de cloroquina e ruxolitinibe em modelos de NMP JAK2V617F e o efeito combinado de metformina e venetoclax em modelo de NMP BCR::ABL1. O modelo murino Knockin-induced de NMP JAK2,sup>V617F foi induzido em animais C57BL/6 CD45.1 por meio do transplante de medula óssea (TMO) provenientes de camundongos JAK2V617F WT/FL Vav-Cre CD45.2. Os animais foram randomizados em grupos que receberam veículo, ruxolitinibe e/ou cloroquina e submetidos a avaliação da carga tumoral. O modelo murino xenográfico de NMP JAK2V617F foi obtido por meio de injeção intracaudal de células SET2 JAK2V617F LUC2+ em animais NSG. Os animais foram randomizados e tratados com veículo, ruxolitinibe e/ou cloroquina, avaliados periodicamente quanto às contagens hematimétricas e emissão de bioluminescência, e acompanhados para avaliação da sobrevida global. O modelo murino xenográfico de LMC BCR::ABL1 em crise blástica mieloide foi estabelecido por meio da injeção de células K562 BCR::ABL1 em animais NSG. Os animais foram randomizados em grupos que receberam veículo, venetoclax e/ou metformina. Os animais foram tratados e avaliados quanto aos parâmetros hematológicos e à presença do marcador CD45h.Os resultados foram analisados considerando p<0.05, os testes Kruskal-Wallis ou Two-Way ANOVA foram aplicados conforme apropriado. No modelo murino JAK2V617F Knockin-induced, a combinação de cloroquina com ruxolutinibe, nas doses utilizadas, não apresentou benefício quando comparado a monoterapia com ruxolutinibe quanto a avaliação dos parâmetros hematológicos, tamanho e peso do baço e percentual de células-tronco e progenitores eritroides no baço e na medula óssea. No modelo murino induzido por células SET2 JAK2V617F LUC2+, não foi observado diferença entre os quatro grupos, quanto aos parâmetros hematológicos, a enxertia das células transplantadas e a sobrevida global. No modelo murino de NMP BCR::ABL1 induzida por células K562, não foi observado diferença na sobrevida global entre os quatro grupos. Em conclusão, nos modelos murinos de NMP JAK2V617F, o tratamento combinado de ruxolitinibe com o inibidor da autofagia cloroquina não foi superior a monoterapia com ruxolitinibe quanto ao efeito antineoplásico e sobrevida. No modelo murino xenográfico de LMC BCR::ABL1 em crise blástica mieloide, o tratamento com venetoclax e/ou metformina não melhorou a sobrevida dos animais tratados comparado ao controle.