Papel de HIF-1α na produção de NETs e expressão de PD-L1 em neutrófilos durante a sepse

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Leandro, Maísa de Oliveira
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: HIF-1α NETs; Neutrófilos; Neutrophils; PD-L1; Sepse; Sepsis
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17147/tde-23012025-092717/

A sepse é uma condição caracterizada por uma resposta desregulada frente a uma infecção, resultando em disfunção orgânica potencialmente fatal. Durante a doença, os neutrófilos podem se tornar hiperativados, aumentando a produção de diversos mediadores inflamatórios, incluindo as armadilhas extracelulares de neutrófilos (NETs), que desempenham um papel crucial nas lesões de órgãos. Embora subtipos de neutrófilos com propriedades fenotípicas e funcionais distintas tenham sido descritos na sepse, o papel específico de cada um deles nas lesões de órgãos ainda não foi completamente determinado. Sabe-se que HIF-1α, um fator de transcrição que regula diversos processos celulares, tem uma importante contribuição deletéria na doença. Porém, ainda não foi investigado o seu papel específico em neutrófilos sépticos. Assim, o objetivo deste estudo é investigar o papel do HIF-1α nos neutrófilos durante a sepse, avaliando sua participação na expressão de PD-L1 e na liberação de NETs. Para isso, desenvolvemos uma linhagem de camundongos apresentando uma deleção condicional de HIF-1α em neutrófilos (HIF-1αf/fLy6GCre). Esses animais e seus controles littermates HIF-1αf/f foram submetidos ao modelo de ligadura e perfuração cecal (CLP), sendo analisado a sobrevida e a produção de citocinas, NETs e marcadores de lesão orgânica. Adicionalmente, os neutrófilos de animais HIF-1αf/fLy6GCre e HIF-1αf/f foram isolados da medula óssea para análises de produção de NETs. Como trabalhos anteriores de nosso grupo demonstraram que a produção de NETs durante a sepse está associada à expressão de PD-L1 em neutrófilos, também analisamos a expressão deste marcador. Nossos resultados demonstram que a deleção de HIF-1α em neutrófilos resultou em uma menor liberação de citocinas pró-inflamatórias e de NETs, que se correlacionou com uma redução na produção de marcadores de lesão orgânica, menor expressão de PD-L1 nos neutrófilos e aumento da sobrevida. De forma semelhante, nos experimentos in vitro, os neutrófilos isolados de camundongos HIF-1αf/fLy6GCre apresentaram menor produção de NETs e redução na expressão de PD-L1 quando comparados com neutrófilos obtidos dos controles HIF-1αf/f. Conclui-se, portanto, que a expressão de HIF-1α em neutrófilos desempenha um papel deletério na fisiopatologia da sepse, mediando a expressão de PD-L1, a produção de NETs e contribuindo para as lesões orgânicas em animais sépticos.