Estudo cromatográfico (HPLC, HPTLC, LC-MS) e análise microscópica das folhas de espécies de Passiflora L

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2002
Autor(a) principal: Pereira, Cíntia Alessandra Matiucci
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-23012026-172633/
Resumo: O desenvolvimento de metodologias analíticas para a análise de flavonoides em espécies de Passiflora é de suma importância, uma vez que essas espécies são constantemente incorporadas em documentos oficiais de normatização, como as farmacopéias. Neste trabalho, foi desenvolvida e validada uma metodologia para quantificação, por HPLC-UV/DAD (cromatografia líquida de alta eficiência com detector de arranjo de diodos), dos flavonoides presentes nas folhas de Passiflora alata (espécie oficial da Farmacopéia Brasileira), Passiflora edulis, Passiflora incarnata e Passiflora caerulea. O procedimento de quantificação proposto permitiu estabelecer o teor de flavonoides totais, expressos como rutina. Verificou-se que os teores de flavonoides totais de P. alata e P. edulis são estatisticamente iguais e significativamente menores do que aqueles encontrados em P. incarnata e P. caerulea. O método desenvolvido mostrou-se adequado para diferenciar as espécies estudadas por meio de seus perfis cromatográficos característicos, podendo também ser aplicado à análise de amostras comerciais e de chás (extratos aquosos). As análises realizadas por LC-MS (cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas), utilizando CID (dissociação induzida por colisão), permitiram a obtenção de espectros pseudo-MS/MS, possibilitando a identificação de isômeros de flavonoides nas espécies de Passiflora. Todas as espécies estudadas apresentam em seus extratos os flavonoides orientina, isoorientina, isovitexina e vitexina, com exceção de P. alata, que não apresenta vitexina. As espécies também foram estudadas por HPTLC (cromatografia em camada delgada de alta eficiência), e o método demonstrou sua aplicabilidade na identificação de amostras comerciais. Foram ainda realizadas análises quantitativas de orientina e isoorientina por HPTLC. O estudo microscópico do material pulverizado demonstrou ser possível caracterizar e identificar as espécies, tanto em amostras de Passiflora quanto na análise de amostras comerciais. O resultado geral das análises (HPLC, HPTLC e microscopia) de amostras comerciais evidenciou o baixo nível técnico do mercado, uma vez que apenas 9% das amostras analisadas foram identificadas como P. alata.
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O procedimento de quantificação proposto permitiu estabelecer o teor de flavonoides totais, expressos como rutina. Verificou-se que os teores de flavonoides totais de P. alata e P. edulis são estatisticamente iguais e significativamente menores do que aqueles encontrados em P. incarnata e P. caerulea. O método desenvolvido mostrou-se adequado para diferenciar as espécies estudadas por meio de seus perfis cromatográficos característicos, podendo também ser aplicado à análise de amostras comerciais e de chás (extratos aquosos). As análises realizadas por LC-MS (cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas), utilizando CID (dissociação induzida por colisão), permitiram a obtenção de espectros pseudo-MS/MS, possibilitando a identificação de isômeros de flavonoides nas espécies de Passiflora. Todas as espécies estudadas apresentam em seus extratos os flavonoides orientina, isoorientina, isovitexina e vitexina, com exceção de P. alata, que não apresenta vitexina. As espécies também foram estudadas por HPTLC (cromatografia em camada delgada de alta eficiência), e o método demonstrou sua aplicabilidade na identificação de amostras comerciais. Foram ainda realizadas análises quantitativas de orientina e isoorientina por HPTLC. O estudo microscópico do material pulverizado demonstrou ser possível caracterizar e identificar as espécies, tanto em amostras de Passiflora quanto na análise de amostras comerciais. O resultado geral das análises (HPLC, HPTLC e microscopia) de amostras comerciais evidenciou o baixo nível técnico do mercado, uma vez que apenas 9% das amostras analisadas foram identificadas como P. alata.The development of analytical methodologies for the analysis of flavonoids in Passiflora species is of great importance, since these species are constantly incorporated into official regulatory documents such as pharmacopoeias. In this work, an HPLC-UV/DAD (high-performance liquid chromatography with photodiode array detection) quantitative method was developed and validated for the determination of flavonoids in the leaves of Passiflora alata (the official species of the Brazilian Pharmacopoeia), Passiflora edulis, Passiflora incarnata, and Passiflora caerulea. The proposed quantification procedure allowed the determination of total flavonoid contents, expressed as rutin. It was verified that the total flavonoid contents of P. alata and P. edulis are statistically equal and significantly lower than those found for P. incarnata and P. caerulea. The developed method proved to be suitable for differentiating the studied species based on their characteristic chromatographic fingerprints and could also be applied to the analysis of commercial samples and teas (aqueous extracts). Analyses performed by LC-MS (liquid chromatography coupled to mass spectrometry) using CID (collision-induced dissociation) resulted in pseudo-MS/MS spectra, allowing the identification of flavonoid isomers in Passiflora species. Orientin, isoorientin, isovitexin, and vitexin were found in all studied species, except for P. alata, which does not contain vitexin. The species were also studied by HPTLC (high-performance thin-layer chromatography), and the method demonstrated its applicability in the identification of commercial samples. Quantitative analyses of orientin and isoorientin were also performed by HPTLC. Microscopic studies of powdered material showed that it is possible to characterize and identify the species, both in Passiflora samples and in commercial samples. The overall results obtained from the analysis of commercial samples (HPLC, HPTLC, and microscopic analysis) demonstrated the low technical level of the market, since only 9% of the analyzed samples were identified as P. alata.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPYariwake, Janete HarumiPereira, Cíntia Alessandra Matiucci2002-05-03info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-23012026-172633/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2026-03-03T13:17:02Zoai:teses.usp.br:tde-23012026-172633Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212026-03-03T13:17:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
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