Localização subcelular da Miosina-V em células do melanoma B16, uma linhagem celular tipo selvagem para o gene dilute

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 1997
Autor(a) principal: Amaral, Rita Goreti
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Não informado.
Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17136/tde-11112025-123449/
Resumo: A descoberta que o gene dilute codifica uma miosina da classe V levou a hipótese que este motor molecular está envolvido no transporte dos melanossomos e/ou no crescimento dos dendritos em melanócitos de mamíferos. O presente estudo teve como objetivo central verificar a distribuição subcelular da miosina-V em relação aos melanossomos nas células altamente pigmentadas do melanoma B16-F10, as quais são tipo selvagem para o gene dilute. Fracionamento subcelular de tumor B16 por centrifugação diferencial e gradiente de sacarose, seguido de análise das frações por Western blots mostrou que a miosina-V está presente em todas as frações, estando enriquecida na fração subcelular de melanossomos purificados. Imunomicroscopia eletrônica mostrou marcação da miosiona-V em melanossomos nos diferentes estágios de maturação. Partículas de ouro foram também observadas nas cisternas do retículo endoplasmático e Golgi, em vesículas (40-70nm) e em mitocôndrias. A estimulação das células B16 por α-MSH, que induz um aumento na síntese de melanossomos e crescimento dendrítico, resultou em um aumento significativo da expressão da miosina-V, enquanto os níveis da miosina-II não mudaram. Esta é a primeira evidência que uma via de sinalização através de cAMP pode regular a expressão do gene dilute. Embora os resultados apresentados aqui sejam consistentes com a hipótese que a miosina-V pode agir como motor para o transporte dos melanossomos eles também sugerem uma função citoplasmática mais ampla, como por exemplo, na segregação ou tráfego de componentes para alvos específicos em membranas ou na dinâmica de citoesqueleto.
id USP_7851ccf969c11368b9ea3b07ba70b0c0
oai_identifier_str oai:teses.usp.br:tde-11112025-123449
network_acronym_str USP
network_name_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
repository_id_str
spelling Localização subcelular da Miosina-V em células do melanoma B16, uma linhagem celular tipo selvagem para o gene diluteNão informado.Não informado.Não informado.A descoberta que o gene dilute codifica uma miosina da classe V levou a hipótese que este motor molecular está envolvido no transporte dos melanossomos e/ou no crescimento dos dendritos em melanócitos de mamíferos. O presente estudo teve como objetivo central verificar a distribuição subcelular da miosina-V em relação aos melanossomos nas células altamente pigmentadas do melanoma B16-F10, as quais são tipo selvagem para o gene dilute. Fracionamento subcelular de tumor B16 por centrifugação diferencial e gradiente de sacarose, seguido de análise das frações por Western blots mostrou que a miosina-V está presente em todas as frações, estando enriquecida na fração subcelular de melanossomos purificados. Imunomicroscopia eletrônica mostrou marcação da miosiona-V em melanossomos nos diferentes estágios de maturação. Partículas de ouro foram também observadas nas cisternas do retículo endoplasmático e Golgi, em vesículas (40-70nm) e em mitocôndrias. A estimulação das células B16 por α-MSH, que induz um aumento na síntese de melanossomos e crescimento dendrítico, resultou em um aumento significativo da expressão da miosina-V, enquanto os níveis da miosina-II não mudaram. Esta é a primeira evidência que uma via de sinalização através de cAMP pode regular a expressão do gene dilute. Embora os resultados apresentados aqui sejam consistentes com a hipótese que a miosina-V pode agir como motor para o transporte dos melanossomos eles também sugerem uma função citoplasmática mais ampla, como por exemplo, na segregação ou tráfego de componentes para alvos específicos em membranas ou na dinâmica de citoesqueleto.The discovery that the dilute gene encodes a class V myosin led to the hypothesis that this molecular motor is involved in melanosome transport and/or dendrite outgrowth in mammalian melanocytes. The present studies were undertaken to gain insight into the subcellular distribution of myosin-V in relation to melanosomes in the highly pigmented melanoma cell line, B16-F10, which is wild-type cell line for the dilute gene. Subcellular fractionation of B16 tumors and Western blot analysis showed that myosin-V is present in all fractions and enriched in a subcellular fraction of purified melanosomes. Immunoelectron microscopy showed myosin-V labeling on melanosomes at different maturation stages. Gold particles were also found on ER and Golgi cisternae as well as on vesicles of about 40-70 nm in diameter and on the mitochondria membrane. Stimulation of B16 cells by α-melanocyte stimulating hormone, which induces an increase in melanosome synthesis and a dramatic dendritic outgrowth, led to a significant increase in myosin-V expression in contrast to conventional myosin II, whose levels did not change. This is the first evidence that a cAMP signaling pathway might regulate the dilute gene expression. Although the results presented here are consistent with the hypothesis that myosin-V may act as a motor for melanosome translocation, they also suggest a broader cytoplasmic function for myosin-V, acting in membrane targeting on melanossomes or other types of organelles or in cytoskeleton dynamics.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPEspreafico, Enilza MariaAmaral, Rita Goreti1997-10-07info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17136/tde-11112025-123449/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-11-11T14:44:02Zoai:teses.usp.br:tde-11112025-123449Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-11-11T14:44:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
dc.title.none.fl_str_mv Localização subcelular da Miosina-V em células do melanoma B16, uma linhagem celular tipo selvagem para o gene dilute
Não informado.
title Localização subcelular da Miosina-V em células do melanoma B16, uma linhagem celular tipo selvagem para o gene dilute
spellingShingle Localização subcelular da Miosina-V em células do melanoma B16, uma linhagem celular tipo selvagem para o gene dilute
Amaral, Rita Goreti
Não informado.
Não informado.
title_short Localização subcelular da Miosina-V em células do melanoma B16, uma linhagem celular tipo selvagem para o gene dilute
title_full Localização subcelular da Miosina-V em células do melanoma B16, uma linhagem celular tipo selvagem para o gene dilute
title_fullStr Localização subcelular da Miosina-V em células do melanoma B16, uma linhagem celular tipo selvagem para o gene dilute
title_full_unstemmed Localização subcelular da Miosina-V em células do melanoma B16, uma linhagem celular tipo selvagem para o gene dilute
title_sort Localização subcelular da Miosina-V em células do melanoma B16, uma linhagem celular tipo selvagem para o gene dilute
author Amaral, Rita Goreti
author_facet Amaral, Rita Goreti
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Espreafico, Enilza Maria
dc.contributor.author.fl_str_mv Amaral, Rita Goreti
dc.subject.por.fl_str_mv Não informado.
Não informado.
topic Não informado.
Não informado.
description A descoberta que o gene dilute codifica uma miosina da classe V levou a hipótese que este motor molecular está envolvido no transporte dos melanossomos e/ou no crescimento dos dendritos em melanócitos de mamíferos. O presente estudo teve como objetivo central verificar a distribuição subcelular da miosina-V em relação aos melanossomos nas células altamente pigmentadas do melanoma B16-F10, as quais são tipo selvagem para o gene dilute. Fracionamento subcelular de tumor B16 por centrifugação diferencial e gradiente de sacarose, seguido de análise das frações por Western blots mostrou que a miosina-V está presente em todas as frações, estando enriquecida na fração subcelular de melanossomos purificados. Imunomicroscopia eletrônica mostrou marcação da miosiona-V em melanossomos nos diferentes estágios de maturação. Partículas de ouro foram também observadas nas cisternas do retículo endoplasmático e Golgi, em vesículas (40-70nm) e em mitocôndrias. A estimulação das células B16 por α-MSH, que induz um aumento na síntese de melanossomos e crescimento dendrítico, resultou em um aumento significativo da expressão da miosina-V, enquanto os níveis da miosina-II não mudaram. Esta é a primeira evidência que uma via de sinalização através de cAMP pode regular a expressão do gene dilute. Embora os resultados apresentados aqui sejam consistentes com a hipótese que a miosina-V pode agir como motor para o transporte dos melanossomos eles também sugerem uma função citoplasmática mais ampla, como por exemplo, na segregação ou tráfego de componentes para alvos específicos em membranas ou na dinâmica de citoesqueleto.
publishDate 1997
dc.date.none.fl_str_mv 1997-10-07
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17136/tde-11112025-123449/
url https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17136/tde-11112025-123449/
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.none.fl_str_mv
dc.rights.driver.fl_str_mv Liberar o conteúdo para acesso público.
info:eu-repo/semantics/openAccess
rights_invalid_str_mv Liberar o conteúdo para acesso público.
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.coverage.none.fl_str_mv
dc.publisher.none.fl_str_mv Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
publisher.none.fl_str_mv Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
dc.source.none.fl_str_mv
reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
instname:Universidade de São Paulo (USP)
instacron:USP
instname_str Universidade de São Paulo (USP)
instacron_str USP
institution USP
reponame_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
collection Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
repository.name.fl_str_mv Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)
repository.mail.fl_str_mv virginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.br
_version_ 1865492191496896512

Registros relacionados