Análise de mutações e da expressão do gene COX-2 e sua relação com a carcinogênese em pacientes portadores de melanoma e lesões de pele não-melanoma

• Ano de defesa: 2005
• Autor(a) principal: Antonucci, Gilmara Ausech
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Não informado.
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17135/tde-16032026-150606/

As radiações ultravioletas (UV) são entre os carcinógenos, o mais comum em nosso ambiente. Dados epidemiológicos apontam as radiações UV como o principal causador de câncer de pele no mundo, além de outros fatores, como dieta, hábito tabagista, idade, e predisposição genética. Dentre os tipos de câncer de pele está o melanoma, o qual é um tipo de câncer que tem origem nos melanócitos (células produtoras de melanina) e tem predominância em adultos brancos. Embora só represente 4% dos tipos de câncer de pele, o melanoma é o mais grave devido à sua alta possibilidade de metástase. Pacientes com melanoma têm um prognóstico pobre devido a freqüente disseminação à distância da doença. Apesar do tamanho da lesão primária ser freqüentemente pequeno, é comum que muitos pacientes já tenham atingido a metástase no momento do diagnóstico. Muitos são os genes envolvidos no desenvolvimento do melanoma. Os processos inflamatórios são muitas vezes precursores da carcinogênese. O gene COX-2 é um dos genes envolvido neste processo, que catalisa a síntese de prostaglandinas, as quais estão associadas às vias de promoção tumoral. Em vista disto, os objetivos deste trabalho foram analisar mutações nos éxons 1, 2, 4 e 5 do gene COX-2 pela técnica de PCR-SSCP, bem como a associação destas mutações com a resposta ao tratamento deste tipo de câncer. Uma outra abordagem foi a análise da expressão gênica por meio da técnica de RT-PCR semiquantitativa a fim de entendermos o comportamento deste gene nos diferentes estadios do tumor e em lesões de pele não-melanoma (controle). Para tanto, foram analisadas mutações em amostras de 50 pacientes divididos segundo o estadio da doença, sendo eles portadores de melanoma primário, melanoma metastático, e com lesões de pele não-melanoma (controle). Por esta análise, 10 amostras apresentaram bandas de migração aberrante no gel de poliacrilamida para o éxon 1. As amostras foram submetidas ao seqüenciamento automático, onde caracterizou-se uma mutação do tipo T>A, que não alterava a proteína, portanto definida como silenciosa. Nos indivíduos controles (lesões de pele não-melanoma), não observamos nenhum tipo de mutação, embora tenha sido observado bandas de migração aberrante durante a PCR-SSCP. Pela análise semiquantitativa da expressão gênica foi possível observar uma expressão homogênea de COX-2 para as amostras de tecidos provenientes de lesões metastáticas, onde a expressão esteve presente até a última diluição do cDNA (1:64), sendo estatisticamente significativa quando comparamos os dados com as amostras provenientes do tecido e da margem de segurança do tumor (p<0,05). O fator idade teve influência sobre a expressão de COX-2 quando comparamos os dois grupos de estudo. Com base nestes dados sugere-se que exista uma associação da expressão de COX-2 com o estadio do tumor. Portanto, a caracterização do comportamento deste gene em nível de mutações e expressão pode ser de valor clínico para o prognóstico e tratamento deste tipo de câncer, podendo indicar que estes pacientes possam ter uma melhor resposta à terapia com inibidores de COX-2.