Obtenção de extrato celular bruto de levedura rico em atividade de glicerol quinase e glicerol-3-fosfato desidrogenase

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 1997
Autor(a) principal: Gattás, Edwil Aparecida de Lucca
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
crude cell extract
evedura
extrato celular bruto
glicerol quinase
glicerol-3-fosfato desidrogenase
glycerol kinase
glycerol-3-phosphate dehydrogenase
yeast
Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-04022026-174923/
Resumo: Este trabalho descreve o estudo e a otimização de condições para a obtenção de extrato celular bruto de levedura (Saccharomyces cerevisiae) apresentando elevadas atividades das enzimas glicerol quinase (GK) e glicerol-3-fosfato desidrogenase (G3PDH). Estas enzimas são de grande interesse para a aplicação em kits de diagnóstico clínico para a determinação de triglicerídeos. A pesquisa investigou diferentes métodos de ruptura celular e a influência da composição do meio de cultura, especialmente a fonte de carbono e o estado metabólico das células, na expressão enzimática. Foi observado que o cultivo em meios contendo glicerol como fonte de carbono promove a indução das atividades GK e G3PDH. Além disso, foram realizados estudos sobre a estabilidade das enzimas no extrato bruto sob diferentes condições de armazenamento e pH. O uso de aditivos estabilizantes permitiu a manutenção da atividade catalítica por períodos prolongados, demonstrando a viabilidade do uso do extrato bruto como uma alternativa de baixo custo em relação às enzimas purificadas.
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