Perfil etiológico e de sensibilidade antimicrobiana dos isolados bacterianos do leite de ovelha

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2024
Autor(a) principal: Gonçalves, Andressa Silveira
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10136/tde-27022025-082118/
Resumo: A produção animal se destaca como possível fonte disseminadora de genes e bactérias resistentes a antimicrobianos, principalmente devido ao uso indiscriminado desses medicamentos. No Brasil, a ovinocultura de leite é uma produção em crescimento, e por ser relativamente recente no país, é um tema ainda pouco explorado e entendido. Portanto, são necessários estudos sobre a etiologia e a resistência antimicrobiana do leite produzido e seus derivados, pois são produtos de origem animal que impactam diretamente a saúde do consumidor final. Dessa forma, o presente estudo objetivou determinar à etiologia e a sensibilidade antimicrobiana dos isolados bacterianos do leite de ovelha, a frequência de mastite, o perfil das propriedades e os fatores de risco para mastite. As coletas foram efetuadas em propriedades comerciais produtoras de leite de ovinos localizadas em municípios das regiões Sul e Sudeste do Brasil. Foram coletadas 270 amostras de leite de 135 ovelhas. As ovelhas selecionadas estavam em média com 71 dias de lactação e foram realizadas avaliação microbiológica, CCS, composição e California Mastitis Test. Após a coleta, um questionário desenvolvido com questões relevantes para o desenvolvimento de mastite foi aplicado para coletar dados sobre as propriedades. Após a avaliação microbiológica, as colônias isoladas foram identificadas por espectrometria de massa MALDI-TOF e foi realizado o teste de sensibilidade dos isolados pertencentes à família Staphylococcaceae, para os princípios ativos: ciprofloxacina, cefoxitina, cloranfenicol, eitromicina, gentamicina, penicilina G, sulfametoxazol e tetraciclina. A identificação molecular dos genes mecA e mecC, por PCR foi realizada para aqueles isolados resistentes à cefoxitina (caracterizados, portanto, como resistentes à meticilina). Devido à sua importância clínica, a identificação molecular do gene blaZ foi realizada também por PCR. Das 247 amostras de leite de ovelhas 49,80% (123/247) apresentou isolamento de um agente bacteriano. O gênero Staphylococcus foi o principal microrganismo isolado, com 76%. O grupo principal com 72,8% dos isolados foi o Staphylococcus coagulase negativos (SCN) e a espécie predominante foi S. chromogenes, com 25,60%. O teste de sensibilidade antimicrobiana realizado nos isolados pertencentes à família Staphylococcaceae, resultou em 45,45% de resistência a pelo menos um princípio ativo testado, 40,26% de resistência à penicilina, 14,29% de resistência à eritromicina e à tetraciclina e 9,09% de resistência a sulfametoxazol. O gene blaZ foi encontrado em três espécies Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus chromogenes e Staphylococcus epidermidis. A prevalência de mastite na forma subclínica foi de 23,55% e foram encontradas alterações na composição do leite. Contudo faz-se necessário o monitoramento dos sistemas agropastoris brasileiros quanto à frequência de bactérias resistentes a antimicrobianos, genes de resistência envolvidos, identificando os pontos deficitários no manejo e que estão possivelmente contribuindo com a seleção e disseminação dos microrganismos resistentes nos rebanhos de ovelhas leiteiras no Brasil.
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Dessa forma, o presente estudo objetivou determinar à etiologia e a sensibilidade antimicrobiana dos isolados bacterianos do leite de ovelha, a frequência de mastite, o perfil das propriedades e os fatores de risco para mastite. As coletas foram efetuadas em propriedades comerciais produtoras de leite de ovinos localizadas em municípios das regiões Sul e Sudeste do Brasil. Foram coletadas 270 amostras de leite de 135 ovelhas. As ovelhas selecionadas estavam em média com 71 dias de lactação e foram realizadas avaliação microbiológica, CCS, composição e California Mastitis Test. Após a coleta, um questionário desenvolvido com questões relevantes para o desenvolvimento de mastite foi aplicado para coletar dados sobre as propriedades. Após a avaliação microbiológica, as colônias isoladas foram identificadas por espectrometria de massa MALDI-TOF e foi realizado o teste de sensibilidade dos isolados pertencentes à família Staphylococcaceae, para os princípios ativos: ciprofloxacina, cefoxitina, cloranfenicol, eitromicina, gentamicina, penicilina G, sulfametoxazol e tetraciclina. A identificação molecular dos genes mecA e mecC, por PCR foi realizada para aqueles isolados resistentes à cefoxitina (caracterizados, portanto, como resistentes à meticilina). Devido à sua importância clínica, a identificação molecular do gene blaZ foi realizada também por PCR. Das 247 amostras de leite de ovelhas 49,80% (123/247) apresentou isolamento de um agente bacteriano. O gênero Staphylococcus foi o principal microrganismo isolado, com 76%. O grupo principal com 72,8% dos isolados foi o Staphylococcus coagulase negativos (SCN) e a espécie predominante foi S. chromogenes, com 25,60%. O teste de sensibilidade antimicrobiana realizado nos isolados pertencentes à família Staphylococcaceae, resultou em 45,45% de resistência a pelo menos um princípio ativo testado, 40,26% de resistência à penicilina, 14,29% de resistência à eritromicina e à tetraciclina e 9,09% de resistência a sulfametoxazol. O gene blaZ foi encontrado em três espécies Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus chromogenes e Staphylococcus epidermidis. A prevalência de mastite na forma subclínica foi de 23,55% e foram encontradas alterações na composição do leite. Contudo faz-se necessário o monitoramento dos sistemas agropastoris brasileiros quanto à frequência de bactérias resistentes a antimicrobianos, genes de resistência envolvidos, identificando os pontos deficitários no manejo e que estão possivelmente contribuindo com a seleção e disseminação dos microrganismos resistentes nos rebanhos de ovelhas leiteiras no Brasil.Animal production is a potential source and disseminator of genes and antimicrobial- resistant bacteria, caused mainly by these medications′ indiscriminate use. Dairy sheep farming in Brazil, is a growing industry, and given its relatively recent establishment in the country, this topic remains poorly understood. Therefore, etiology and antimicrobial resistance studies are necessary to produce milk and its derivatives, as these animal-derived products directly impact final consumer health. Therefore, the present study objective was to determine sheep milk etiology and antimicrobial resistance, bacterial isolates profile, mastitis frequency, properties profile, and mastitis risk factors. Sample collection was conducted on commercial dairy sheep farms in Brazil′ s southern and southeast municipalities. A total of 270 milk samples were collected from 135 sheep, averaging 71 days of lactation. The tests performed were microbiological evaluation, somatic cell count (SCC), composition analysis, and California Mastitis Test. Following milk collection, a questionnaire with relevant questions for mastitis development was applied to gather data from the farms. After microbiological evaluation, MALDI-TOF mass spectrometry was used to identify isolated colonies and was performed sensitivity test on Staphylococcaceae family isolates for the active ingredients: ciprofloxacin, cefoxitin, chloramphenicol, erythromycin, gentamicin, penicillin G, sulfamethoxazole, and tetracycline. MecA and mecC genes molecular identification was realized by PCR on cefoxitin-resistant isolates (thus characterized as methicillin-resistant). Due to its clinical importance, blaZ gene molecular identification was also performed using PCR. 49.80% of 247 sheep milk samples (123/247) presented at least one bacterial agent. The main microorganism isolated was the Staphylococcus genus, accounting for 76%. The leading group was coagulase-negative Staphylococcus (CNS), representing 72.8% of the isolates, and the predominant species accounting 25.60% was S. chromogenes. Staphylococcaceae family Isolates submitted to antimicrobial sensitivity testing revealed 45.45% resistance to at least one active ingredient tested, 40.26% were penicillin-resistant, 14.29% were erythromycin and tetracycline- resistant, 9.09% were sulfamethoxazole resistant. The blaZ gene was detected in three species: Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus chromogenes, and Staphylococcus epidermidis. Subclinical mastitis prevalence was 23.55%, and milk composition changes were observed. However, monitoring Brazilian agropastoral systems′ frequency of antimicrobial-resistant bacteria and genes resistance involved is necessary, as well as identifying management deficiencies in practices that may contribute to resistant microorganisms′ selection and dissemination in Brazilian dairy sheep flocks.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPGaeta, Natália CarrilloRaimondo, Raquel Fraga e SilvaGonçalves, Andressa Silveira2024-12-03info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10136/tde-27022025-082118/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-04-17T18:15:02Zoai:teses.usp.br:tde-27022025-082118Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-04-17T18:15:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
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