Influência de diferentes fontes de carbono e nitrogênio na produção do antitumoral retamicina por Streptomyces olindensis ICB20.
| Ano de defesa: | 2005 |
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Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
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| Link de acesso: | https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-25092025-140049/ |
Resumo: | O objetivo desta tese de Doutorado foi o estudo da influência de diferentes fontes de carbono e de nitrogênio na produção do antibiótico retamicina em cultivos descontínuos de Streptomyces olindensis ICB20 utilizando-se planejamento experimental para delineamento dos cultivos realizados. Foram realizados cultivos em incubador rotativo, utilizando Quadrado Latino para a definição dos melhores pares de fontes de carbono e nitrogênio para o crescimento celular e produção de retamicina. As fontes de carbono estudadas foram: glicose, maltose, amido e glicerol e as fontes de nitrogênio foram: sulfato de amônio, nitrato de sódio, extrato de levedura e Samprosoy® (proteínas isoladas de soja). Como condições de cultivo em incubador rotativo, foram utilizados 200 rpm de agitação e 30°C de temperatura. De acordo com os resultados obtidos e com base nas análises estatísticas efetuadas, os melhores pares de fontes escolhidos foram: glicose e extrato de levedura para o crescimento celular e amido e nitrato de sódio para a produção de retamicina. Posteriormente, foi utilizado projeto fatorial simples 2² para estudar a influência da concentração dos pares de fontes escolhidos na etapa anterior, no crescimento celular e na produção de retamicina em cultivos em biorreator. Foram utilizados biorreatores de bancada de 15 L de capacidade, com volume útil de 10 L, mantendo-se fixas as seguintes condições: 500 rpm de agitação, 1vvm de aeração, pH 7,0 e 30°C. As análisesestatísticas demonstraram que as melhores concentrações estudadas foram: 10 g/L de glicose e 100 mM de extrato de levedura (100 mM em termos de nitrogênio total) para formação de células e 10 g/L de amido e 100 mM de nitrato de sódio (100 mM em termos de nitrogênio total) para produção de retamicina total. ) Um cultivo descontínuo em duas etapas foi realizado também em biorreator, mantendo-se as mesmas condições de cultivos fixas, sendo que na primeira etapa foram utilizados glicose e extrato de levedura para favorecimento do crescimento celular e, na segunda etapa foi adicionado um meio de cultivo contendo amido e nitrato de sódio para favorecimento da produção do antitumoral. A estratégia utilizada neste cultivo mostrou-se interessante, e altamente promissora, uma vez que os resultados obtidos superaram os resultados anteriores, tanto em termos de produção total de retamicina quanto em termos de produtividade e produção específica. Foram também testados neste trabalho, novos métodos para a determinação da retamicina, tais como, espectrofotometria de varredura e cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) e, ainda, foram testados métodos para comprovar a atividade biológica da retamicina, como testes de atividade antimicrobiana e atividade antitumoral. |
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Influência de diferentes fontes de carbono e nitrogênio na produção do antitumoral retamicina por Streptomyces olindensis ICB20.Untitled in englishAntibióticosAntibioticsBiochemical reactorsReatores bioquímicosO objetivo desta tese de Doutorado foi o estudo da influência de diferentes fontes de carbono e de nitrogênio na produção do antibiótico retamicina em cultivos descontínuos de Streptomyces olindensis ICB20 utilizando-se planejamento experimental para delineamento dos cultivos realizados. Foram realizados cultivos em incubador rotativo, utilizando Quadrado Latino para a definição dos melhores pares de fontes de carbono e nitrogênio para o crescimento celular e produção de retamicina. As fontes de carbono estudadas foram: glicose, maltose, amido e glicerol e as fontes de nitrogênio foram: sulfato de amônio, nitrato de sódio, extrato de levedura e Samprosoy® (proteínas isoladas de soja). Como condições de cultivo em incubador rotativo, foram utilizados 200 rpm de agitação e 30°C de temperatura. De acordo com os resultados obtidos e com base nas análises estatísticas efetuadas, os melhores pares de fontes escolhidos foram: glicose e extrato de levedura para o crescimento celular e amido e nitrato de sódio para a produção de retamicina. Posteriormente, foi utilizado projeto fatorial simples 2² para estudar a influência da concentração dos pares de fontes escolhidos na etapa anterior, no crescimento celular e na produção de retamicina em cultivos em biorreator. Foram utilizados biorreatores de bancada de 15 L de capacidade, com volume útil de 10 L, mantendo-se fixas as seguintes condições: 500 rpm de agitação, 1vvm de aeração, pH 7,0 e 30°C. As análisesestatísticas demonstraram que as melhores concentrações estudadas foram: 10 g/L de glicose e 100 mM de extrato de levedura (100 mM em termos de nitrogênio total) para formação de células e 10 g/L de amido e 100 mM de nitrato de sódio (100 mM em termos de nitrogênio total) para produção de retamicina total. ) Um cultivo descontínuo em duas etapas foi realizado também em biorreator, mantendo-se as mesmas condições de cultivos fixas, sendo que na primeira etapa foram utilizados glicose e extrato de levedura para favorecimento do crescimento celular e, na segunda etapa foi adicionado um meio de cultivo contendo amido e nitrato de sódio para favorecimento da produção do antitumoral. A estratégia utilizada neste cultivo mostrou-se interessante, e altamente promissora, uma vez que os resultados obtidos superaram os resultados anteriores, tanto em termos de produção total de retamicina quanto em termos de produtividade e produção específica. Foram também testados neste trabalho, novos métodos para a determinação da retamicina, tais como, espectrofotometria de varredura e cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) e, ainda, foram testados métodos para comprovar a atividade biológica da retamicina, como testes de atividade antimicrobiana e atividade antitumoral.The objective of this work was to study the effects of different carbon and nitrogen sources on retamycin production by Streptomyces olindensis ICB20 in batch cultivations through an experimental design. Preliminarily, a Latin Square was used to design a set of experiments on a rotary shaker to determine the best carbon and nitrogen sources for cell growth and retamycin production. Glucose, maltose, starch and glycerol were employed as carbon sources and ammonium sulphate, sodium nitrate, yeast extract and Samprosoy® (isolated soybean protein) as nitrogen sources. While glucose and yeast extract proved to be the best sources for cell growth, starch and sodium nitrate most positively influenced retamycin production. A factorial design 2² was used to study the effects of different concentrations of the previously chosen carbon and nitrogen sources on cell growth and retamycin production in batch bioreactor cultivations. The runs were carried out in 15 L bioreactors with a working volume of 10 L at 500 r.p.m., 1.0 v.v.m. (specific aeration rate) and 30°C. Statistical analyses showed that the optimal concentrations for cell growth and total retamycin production were 10 g L -1 glucose-100 mM yeast extract (100 mM in terms of total nitrogen) and 10 g L -1 starch-100 mM sodium nitrate (100 mM in terms of total nitrogen), respectively. A two-step batch cultivation was performed in a bioreactor at the previously employed conditions. First, cell growth occurred in a culture medium containing glucose and yeast extract. Then, starch-sodium nitrate culture medium was added to the culture to favour retamycin production. The process strategy resulted in higher retamycin levels compared to previous results. New methods for the determination of retamycin using scanning spectrophotometry and high performance liquid chromatography (HPLC) and for the measurement of antimicrobial and antineoplasic activity of retamycin were also tested.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPFacciotti, Maria Candida ReginatoGuimarães, Luciana Maria2005-03-21info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-25092025-140049/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-09-25T17:04:02Zoai:teses.usp.br:tde-25092025-140049Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-09-25T17:04:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
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